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上海博耀生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： elisa試劑盒,一抗,二抗，抗體,ABI |
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更新時(shí)間：2018-09-12 09:53:05瀏覽次數(shù)：742
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小鼠細(xì)胞色素C（Cyt-C）ELISA試劑盒
Mouse Cytochrome-C,Cyt-C ELISA Kit
包裝：96T/48T
檢測(cè)標(biāo)本：包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。
保存：2-8℃，一年,。
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小鼠細(xì)胞色素C（Cyt-C）ELISA試劑盒供應(yīng)商：
上海博耀生物科技公司是專業(yè)的ELISA試劑盒供應(yīng)商!本公司專業(yè)經(jīng)銷elisa試劑盒,、omega試劑盒、抗體,、動(dòng)物血清,、標(biāo)準(zhǔn)品等生物試劑,產(chǎn)品質(zhì)量有保證,售后服務(wù)有保障。垂詢,！
相關(guān)知識(shí)>>>>>>>
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標(biāo)板 1塊板（96T） 半塊板（48T） 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標(biāo)準(zhǔn)品：800pg/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按說明書進(jìn)行稀稀
空白對(duì)照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型
生物素標(biāo)記的抗IFN-γ抗體 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型
洗滌緩沖液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml） 按說明書進(jìn)行稀釋
底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
終止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
標(biāo)本稀釋液 1瓶（12ml） 1瓶（6.0ml） 即用型
細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）,。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí)，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀 釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬 /ml 左右,。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后，稱取重量,。加入一定量的 PBS ,，緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin （ 抑肽酶）。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻 漿充分,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）,。仔細(xì)收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用,。
操作注意事項(xiàng)
1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存,。
2． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。
3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7． 底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8． 加入試劑的順序應(yīng)*,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9． 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
樣品收集、處理及保存方法
1,、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2、 血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3,、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4,、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘，取上清液
5,、 保存------如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作步驟：
參照說明書（具體說明書請(qǐng)發(fā)郵件::shkbsw）
靈敏度：
具體請(qǐng)查看說明書.
檢測(cè)范圍（RANGN）：
具體請(qǐng)查看說明書.
結(jié)果判定：
試驗(yàn)有效性：陽性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為人Hp-IgM陰性
陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為人Hp-IgM陽性
