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主營(yíng)產(chǎn)品: elisa試劑盒,一抗,二抗,,抗體,ABI |
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更新時(shí)間:2018-09-12 09:53:05瀏覽次數(shù):814
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小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒
Mouse Cyclosporine A,CsA ELISA Kit
包裝:96T/48T
檢測(cè)標(biāo)本:包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。
保存:2-8℃,,一年。
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小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒供應(yīng)商:
上海博耀生物科技公司是專業(yè)的ELISA試劑盒供應(yīng)商!本公司專業(yè)經(jīng)銷elisa試劑盒,、omega試劑盒,、抗體、動(dòng)物血清,、標(biāo)準(zhǔn)品等生物試劑,產(chǎn)品質(zhì)量有保證,售后服務(wù)有保障,。垂詢!
相關(guān)知識(shí)>>>>>>>
自備材料
1. 蒸餾水,。
2. 加樣器:5ul,、10ul、50ul,、100ul,、200、500ul、1000ul,。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等,。
樣品采集:
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本, 將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月,。-70度可保存6個(gè)月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
操作步驟:
參照說明書(具體說明書請(qǐng)發(fā)郵件::shkbsw)
靈敏度:
具體請(qǐng)查看說明書.
檢測(cè)范圍(RANGN):
具體請(qǐng)查看說明書.
結(jié)果判定:
試驗(yàn)有效性:陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10
臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為人Hp-IgM陰性
陽(yáng)性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為人Hp-IgM陽(yáng)性
操作步驟
1. 使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí),。
4. 甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
7. 每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8. 取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn),。