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人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶（TP）ELISA試劑盒

Human thymidinephosphorylase,TP ELISA Kit

包裝：96T/48T
檢測標(biāo)本：包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。
保存：2-8℃,，一年,。

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人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶（TP）ELISA試劑盒供應(yīng)商：

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液體類標(biāo)本：
標(biāo)本必須為液體，不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。 1ml 的 全血可得到 0.5ml 的血清或血漿,。每個標(biāo)本量收集體積＝ 100ul × 檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書,。
血清：
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
試劑的準備
1． 標(biāo)準品：標(biāo)準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,，不能儲存,。稀釋前將標(biāo)準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：
800 pg/ml （6號標(biāo)準品） 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul,。
400 pg/ml （5號標(biāo)準品） 100ul的原倍標(biāo)準品加入100ul的標(biāo)準品稀釋液
200 pg/ml （4號標(biāo)準品） 100ul的5號標(biāo)準品加入100ul的標(biāo)準品稀釋液
100 pg/ml （3號標(biāo)準品） 100ul的4號標(biāo)準品加入100ul的標(biāo)準品稀釋液
50 pg/ml （2號標(biāo)準品） 100ul的3號標(biāo)準品加入100ul的標(biāo)準品稀釋液
25 pg/ml （1號標(biāo)準品） 100ul的2號標(biāo)準品加入100ul的標(biāo)準品稀釋液
0 pg/ml （空白對照） 原始濃度不用稀釋直接加入50ul,。
2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟
1． 使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3． 加入稀釋好后的標(biāo)準品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時,。
4． 甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘,。
6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
7． 每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8． 取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
9． 在450nm波長處測定各孔的OD值,。
操作步驟：
參照說明書（具體說明書請發(fā)郵件::shkbsw）
靈敏度：
具體請查看說明書.
檢測范圍（RANGN）：
具體請查看說明書.
結(jié)果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為人Hp-IgM陰性
陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為人Hp-IgM陽性
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標(biāo)板 1塊板（96T） 半塊板（48T） 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標(biāo)準品：800pg/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按說明書進行稀稀
空白對照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型
標(biāo)準品稀釋緩沖液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型
生物素標(biāo)記的抗IFN-γ抗體 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型
洗滌緩沖液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml） 按說明書進行稀釋
底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
終止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
標(biāo)本稀釋液 1瓶（12ml） 1瓶（6.0ml） 即用型