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人集落刺激因子（CSF）ELISA試劑盒

Human colony-stimulating factor,CSF ELISA Kit

包裝：96T/48T
檢測標本：包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。
保存：2-8℃,，一年,。

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人集落刺激因子（CSF）ELISA試劑盒供應商：

上海博耀生物科技公司是專業(yè)的ELISA試劑盒供應商!本公司專業(yè)經(jīng)銷elisa試劑盒、omega試劑盒,、抗體,、動物血清、標準品等生物試劑,產(chǎn)品質(zhì)量有保證,售后服務有保障,。垂詢,！

相關知識>>>>>>>
計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線,，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度,。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果,。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準,。
細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）,。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的 成份時,，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀 釋細胞懸液,，細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。
組織標本：
切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的 PBS ，緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin （ 抑肽酶）,。用手工或勻漿器將標本勻 漿充分,。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用,。
試劑的準備
1． 標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備,，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻,。稀釋比例按下表中進行：
800 pg/ml （6號標準品） 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul,。
400 pg/ml （5號標準品） 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
200 pg/ml （4號標準品） 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
100 pg/ml （3號標準品） 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
50 pg/ml （2號標準品） 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
25 pg/ml （1號標準品） 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0 pg/ml （空白對照） 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋,。

產(chǎn)品用途:
科研ELISA檢測試劑盒.提供實驗代測服務.
產(chǎn)品范圍:
人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細胞因子;細胞凋亡,活性多肽,、自身抗體 ,血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研ELISA檢測試劑盒 提供實驗代測服務
操作步驟
1． 使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi),。
3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時,。
4． 甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。
6． 甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
7． 每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8． 取出酶標板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果,。
9． 在450nm波長處測定各孔的OD值,。