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KB1199A人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子Elisa試劑盒,巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子測(cè)試盒,,MIF ELISA試劑盒
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人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒

Human Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit

包裝:96T/48T
檢測(cè)標(biāo)本:包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。
保存:2-8℃,,一年,。

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相關(guān)知識(shí)>>>>>>>
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),,用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分),。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí),,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀 釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn) /ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,,稱取重量,。加入一定量的 PBS ,緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶),。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻 漿充分,。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,,如有必要,,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用,。
樣品采集:
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本, 將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月,。-70度可保存6個(gè)月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
產(chǎn)品用途:
科研ELISA檢測(cè)試劑盒.提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù).
產(chǎn)品范圍:
人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動(dòng)物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽,、自身抗體 ,血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌,、自身抗體科研ELISA檢測(cè)試劑盒 提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)
操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時(shí),。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6. 甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul,、10ul,、50ul、100ul,、200,、500ul、1000ul,。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等,。
 

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