人晶狀體上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，人晶狀體上皮細胞分離自晶狀體組織,；晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層，僅含有上皮細胞及其產(chǎn)物,，晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞分開,；因而，晶狀體上皮細胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾,，又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染,，保證了培養(yǎng)中細胞成分的單一性。晶狀體上皮細胞主要負責調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡,，包括電解質(zhì)和液體的輸送,。在正常的發(fā)育過程中，晶狀體上皮細胞分化和成熟,，然后遷移到晶狀體內(nèi)部,，產(chǎn)生晶體蛋白，自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞,，并最終失去細胞核和其它的細胞器,。研究表明，晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控,，包括表皮生長因子和胰島素等,。細胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形，呈單層生長,、連成膜狀,。晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細胞，其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān),，體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段,。

1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min,；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,；

3.用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),；

4.待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基,。

備注：由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考

客戶在細胞培養(yǎng)過程中,，有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務電話： 按 2,，我們隨時給予解答,。

1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2.在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作。

3.傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4.運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。