一,、細(xì)胞基本屬性 | ||||
細(xì)胞名稱 | 人附睪成纖維細(xì)胞 | |||
種屬來源 | 人 | |||
組織來源 | 附睪組織 | |||
生長特性 | 貼壁生長 | |||
形態(tài)特征 | 長梭形,不規(guī)則細(xì)胞 | |||
質(zhì)量檢測 | 波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,,純度高于 90%,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等 | |||
產(chǎn)品規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | |||
培養(yǎng)基 | 人附睪成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃ | |||
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | |||
消化液 | 0.25% | |||
產(chǎn)品貨期 | 7-8周左右 | |||
運(yùn)輸方式 | T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵) | |||
供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
背景介紹 | 附睪是一個(gè)多數(shù)曲折,、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官,,一面連接著輸精管,一面連接著睪丸的曲細(xì)精管,。當(dāng)精子離開睪丸時(shí),,就跑到附睪里,繼續(xù)生長成熟,。附睪管除貯存精子外還能分泌附睪液,,其中含有某些激素,、酶和特異的營養(yǎng)物質(zhì),,它們有助于精子的成熟,。附睪管由黏膜、肌層和外膜組成,。其中,,外膜層主要是由成纖維細(xì)胞構(gòu)成。 | |||
二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨處理 | 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) | |||
傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) | |||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿,。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿 | |||
傳代方法 | 1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次; 2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,; 3.用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),; 4.待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基,。 | |||
備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考 客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,,我們隨時(shí)給予解答,。 | ||||
三、注意事項(xiàng) | ||||
重要提醒 | 1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。 2.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作。 3.傳代培養(yǎng)過程中,,消化時(shí)間不宜過長,,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。 4.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。 | |||
到貨須知 | 1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),,細(xì)胞是否解凍,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。 2.靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),,記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。 3.由于運(yùn)輸?shù)脑颍糠旨?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,,是正?,F(xiàn)象。個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時(shí)和我們聯(lián)系,,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決,。 4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子等,,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。 | |||
四,、售后服務(wù) | ||||
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn) | 1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,,細(xì)胞丟失、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,,重發(fā); 2.收到細(xì)胞未開封,,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā),; 3.收到細(xì)胞3天內(nèi),,發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā),; 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā); 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時(shí)并且未開封,,出現(xiàn)污染,,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā),; 6.細(xì)胞活性問題,,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā); 7.視具體情況而定,。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細(xì)胞污染,,不重發(fā); 2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,,不重發(fā),; 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā),; 4.細(xì)胞狀態(tài)不好,,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā),; 5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,,不重發(fā),; 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,不重發(fā),; 7.視具體情況而定,。 |