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一,、ELISA實驗通用規(guī)則
1,、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定,。但有專業(yè)人員進行矯正。
2,、要配備20ul,、50ul、100ul,、1000ul和排槍各一支,。吸取不同的液體后,要更換槍頭,。即使是吸取標準品時,。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,,使各種試劑都恢復到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定,。
4,、實驗時,要使底物避光保存,。
5,、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確,。
6,、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差,。
7、將液體加到酶標孔中時,,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去,。
8,、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,,混勻液體,。也可以用酶標儀的晃動功能。
9,、溫浴時,,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
10,、洗板時,,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,,使清洗更加*,。沒有洗板機時,倒去液體后,,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干,。
11、洗液不夠時,,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存,。
12、底物是光敏感的,,要在臨用前現(xiàn)配,。
13、檢測前,,要打開酶標儀,,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
14,、底物有一定的毒性,,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸,。
15,、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果,。
16,、溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定。
17,、應盡量做雙孔實驗,,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。
18,、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證
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