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南京賽泓瑞生物科技有限公司資料大小
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515次一,、定義:
弗氏佐劑(Freundadjuvant),這是目前zui常用于動物實驗的佐劑,,它是將抗原水溶液與油劑(石蠟油或植物油)等量混合,再加乳化劑(羊毛脂或葉吐溫80)制成油包水抗原乳劑,,稱之為不*弗氏佐劑,。如在不*佐劑中加入分枝桿菌(如死卡苗)則稱為*弗氏佐劑。
二,、制備方法:
是現(xiàn)在動物實驗中zui常用的佐劑,,分為不*和*。不*是液體石蠟與羊毛脂混合而成,組分比為1~5:1,,可根據(jù)需要而定,,通常為2:1,。不*佐劑中加卡介苗(zui終濃度為2~20mg/ml)或死的結核分枝桿菌,,即為*(FCA)。一般注射時用1/2體積FCA加上1/2體積的抗原進行乳化,,第二次或第三次注射時用不*佐劑或不用佐劑,。如不加佐劑,則抗原量增大10-20倍,。
配制方法:按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內,,用超聲波使之混勻,高壓滅菌,,置4℃下保存?zhèn)溆谩?br /> 在免疫動物前,,先將與抗原按一定比例混合,佐劑和抗原體積比一般為1:1,,制備成"油包水"乳狀液,。因為含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化復合物,注射入動物體內時一定要保持乳化狀態(tài),??乖昧恳暱乖肿恿坎煌懊庖咴约懊庖邉游锊煌幸欢ú町悾瑹o統(tǒng)一標準和固定模式,。一般是每兔(約2kg重)或每羊(約20kg重)第1次注射抗原1mg,,以后逐次增加抗原量,zui多每次不超過3mg,。佐劑與抗原乳化可按如下方法進行:
?。?)研磨法:先將佐劑加熱并取適量放入無菌的玻璃研缽內,待冷卻后再緩緩滴入等體積的抗原溶液,,邊滴邊按同一方向研磨,,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,,繼續(xù)研磨一段時間,,使之成為乳白色粘稠的油包水乳劑。本法適于制備大量的佐劑抗原,,缺點是研缽壁上粘附大量乳劑,,抗原損失較大。
?。?)注射器混合法:將等量的和抗原溶液分別吸入兩個注射器內,,兩注射器之間以一細膠管相連,注意排凈空氣,,然后交替推動針管,,直至形成粘稠的乳劑為止,。本法優(yōu)點是容易做到無菌操作,抗原損失少,,適用于制備少量的抗原乳劑,。但同時難以乳化*,個別抗原,,用塑料注射器根本推不動,,而用玻璃注射器又有滲漏。制備好的乳化劑經(jīng)鑒定才能適用,。鑒定方法是將乳化劑滴入冷水中,,若保持完整不分散,成滴狀浮于水面,,即乳化*,,為合格的油包水劑。
?。?) 超聲:實驗室條件好點的,,比如說有超聲破碎儀的,一定要控制超聲頻率和時間,,超聲容易激發(fā)一些自由基,,對抗原有未知損害。乳化方法要根據(jù)抗原和需要而定,。三,、其他免疫佐劑的物質
也屬于免疫佐劑。其他免疫佐劑的物質有:①微生物及其產(chǎn)物,,常用的微生物有分枝桿菌,、短小棒狀桿菌、百日咳桿菌以及處左蘭氏陰性桿菌的提取物脂多糖,,自分枝桿菌的提取物質胞壁酰二肽等,。②多聚核苷酸,如多聚肌苷酸:胞苷酸(poly1:C),多聚腺苷酸(poly1:A:μ)等;,。③無機物,,如明礬及氫化鋁等。
佐劑的作用機制尚不*清楚:①它可能增加抗原的表面面積,,易為巨噬細胞所吞噬,;②延長抗原在體內的存留期,增加與免疫細胞接觸的機遇,;③誘發(fā)抗原注射部位及其局部淋巴結的炎癥反應,,有利于刺激免疫細胞的增殖作用。
四、區(qū)別:
弗氏不*佐劑
產(chǎn)品簡介:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,,含結核分枝桿菌的細胞壁成分,。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應,。弗氏*佐劑用于初次免疫刺激,。為了減少副作用,不含結核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強免疫,。
弗氏*佐劑
產(chǎn)品簡介:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,,能夠非常有效的誘導產(chǎn)生高滴度的抗體,。弗氏*佐劑含結核分枝桿菌的細胞壁成分,,可以加強對抗原的抗體反應。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,,并刺激局部免疫反應,。
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