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微量分光光度計(jì)常見用途和常用波長(zhǎng)

時(shí)間:2016-7-13 閱讀:4478
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   1.微量分光光度計(jì)核酸的定量
 
  核酸的高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260 nm。利用260nm的波長(zhǎng)可以定量測(cè)量溶于緩沖液的寡核苷酸,,單鏈,、雙鏈DNA,以及RNA的濃度,。
 
  除了核酸濃度,,分光光度計(jì)同時(shí)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度,。如A260/A280的比值,用于評(píng)估樣品的純度,,因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?80nm,。純凈的樣品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA),。如果比值低于1.8或者2.0,,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
 
  A230表示樣品中存在一些污染物,,如碳水化合物,,多肽,苯酚等,,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0,。
 
  A320檢測(cè)溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品,,A320一般是0,。
 
  2.微量分光光度計(jì)蛋白質(zhì)的直接定量
 
  這種方法是在280nm波長(zhǎng),直接測(cè)試蛋白,。選擇Warburg公式,,光度計(jì)可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應(yīng)的換算方法,,將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度,。
 
  3.微量分光光度計(jì)細(xì)菌細(xì)胞密度
 
  細(xì)菌培養(yǎng)過程中,需要采用分光光度計(jì)準(zhǔn)確測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度,。
 
  OD600是追蹤液體培養(yǎng)物中微生物生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)方法,。在600nm波長(zhǎng)下,以未加菌液的培養(yǎng)液作為空白液,,測(cè)量定量培養(yǎng)后的含菌培養(yǎng)液,。

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