倒置顯微鏡組成和普通顯微鏡一樣,,主要包括三部分:機械部分,、照明部分、光學(xué)部分,。 倒置顯微鏡組成和普通正置顯微鏡一樣,,只不過物鏡與照明系統(tǒng)顛倒,前者在載物臺之下,,后者在載物臺之上,。 這樣的構(gòu)造使得照明聚光系統(tǒng)與載物臺的有效距離可以顯著擴大,便于放置培養(yǎng)皿,、細胞培養(yǎng)瓶等較厚的待觀察器具(當(dāng)然載玻片等也可以),,而同時物鏡與材料之間的工作距離不必很大。 倒置顯微鏡供醫(yī)療衛(wèi)生單位,、高等院校,、研究所用于微生物、細胞,、細菌,、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察,,可連續(xù)觀察細胞,、細菌等在培養(yǎng)液中繁殖分裂的過程,并可將此過程中的任一形態(tài)拍攝下來,。 在細胞學(xué),、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué),、免疫學(xué),、遺傳工程學(xué)、工業(yè)微生物學(xué),、植物學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛,。
熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸,、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等,。 對被檢物體來說,熒光產(chǎn)生方式有兩種:自發(fā)熒光,,經(jīng)過紫外照射直接發(fā)出熒光,;繼發(fā)熒光,被觀察物體經(jīng)過熒光染料處理之后,,經(jīng)過紫外光照射才能發(fā)出熒光,。 細胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,,受紫外線照射后產(chǎn)生自發(fā)熒光,;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)出繼發(fā)熒光,。 熒光顯微鏡利用一個高發(fā)光效率的點光源,經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(紫外光365nm或紫藍光420nm)作為激發(fā)光,、激發(fā)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。 這樣在強烈的對襯背景下,,即使熒光很微弱也易辨認,,敏感性高,主要用于細胞結(jié)構(gòu)和功能以及化學(xué)成分等的研究,。
熒光顯微鏡分為透射式和落射式兩類,,前者較為原始,后者較為先進,。 兩類熒光顯微鏡的基本構(gòu)建相似,,主要區(qū)別為:透射式的激發(fā)光透過標(biāo)本,標(biāo)本整體產(chǎn)生熒光,熒光再進入物鏡,,放大倍數(shù)越高,,熒光越弱;落射式的激發(fā)光投射在標(biāo)本表面,,標(biāo)本表面產(chǎn)生熒光,,熒光再進入物鏡,放大倍數(shù)越高,,熒光越強,,適于進行高倍觀察,。 熒光顯微鏡主要構(gòu)件有汞燈光源,、激發(fā)濾板、分色鏡(落射式),、壓制濾板,、暗場聚光鏡(透射式)等。此外,,由于汞燈發(fā)熱嚴(yán)重,,大多還裝有吸熱濾鏡。 部分熒光顯微鏡還有相差物鏡和環(huán)狀光闌,,因此可以進行相差觀察,。 還有的熒光顯微鏡采取倒置構(gòu)架,又是倒置顯微鏡,,等等,。