離心技術(shù)在生物學(xué)上的應(yīng)用
前言
離心技術(shù)在生物科學(xué),,特別是在生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究域,,已得到十分廣泛的應(yīng)用,,每個(gè)生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室都要裝備多種型式的離心機(jī),。離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,,生物樣品懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,,由于巨大的離心力作用,,使懸浮的微小顆粒(細(xì)胞器、生物大分子的沉淀等)以定的速度沉降,,從而與溶液得以分離,,而沉降速度取決于顆粒的質(zhì)量、大小和密度,?! ?br /> 般情況下,低速離心時(shí)常以轉(zhuǎn)速“rpm”來(lái)表示,,高速離心時(shí)則以“g”表示,。計(jì)算顆粒的相對(duì)離心力時(shí),應(yīng)注意離心管與旋轉(zhuǎn)軸中心的距離“r”不同,,即沉降顆粒在離心管中所處位置不同,,則所受離心力也不同。因此在報(bào)告超離心條件時(shí),,通??偸怯玫匦囊Φ谋稊?shù)“×g”代替每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)“rpm”,,因?yàn)樗梢哉鎸?shí)地反映顆粒在離心管內(nèi)不同位置的離心力及其動(dòng)態(tài)變化??萍嘉墨I(xiàn)中離心力的數(shù)據(jù)通常是指其平均值(RCFav),,即離心管中點(diǎn)的離心力。
為便于進(jìn)行轉(zhuǎn)速和相對(duì)離心力之間的換算,,Dole和Cotzias利用RCF的計(jì)算公式,,制作了轉(zhuǎn)速“rpm”、相對(duì)離心力“RCF”和旋轉(zhuǎn)半徑“r”三者關(guān)系的列線圖,,圖式法比公式計(jì)算法方便(列線圖參見(jiàn)附錄),。換算時(shí),先在r標(biāo)尺上取已知的半徑和在rpm標(biāo)尺上取已知的離心機(jī)轉(zhuǎn)數(shù),,然后將這兩點(diǎn)間劃條直線,,與圖中RCF標(biāo)尺上的交叉點(diǎn)即為相應(yīng)的相對(duì)離心力數(shù)值。注意,,若已知的轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標(biāo)尺的右邊,,則應(yīng)讀取RCF標(biāo)尺右邊的數(shù)值,轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標(biāo)尺左邊,,則應(yīng)讀取RCF標(biāo)尺左邊的數(shù)值,。
離心機(jī)的主要構(gòu)造和類型
離心機(jī)可分為工業(yè)用離心機(jī)和實(shí)驗(yàn)用離心機(jī)。實(shí)驗(yàn)用離心機(jī)又分為制備性離心機(jī)和分析性離心機(jī),,制備性離心機(jī)主要用于分離各種生物材料,,每次分離的樣品容量比較大,分析性離心機(jī)般都帶有光學(xué)系統(tǒng),,主要用于研究純的生物大分子和顆粒的理化性質(zhì),,依據(jù)待測(cè)物質(zhì)在離心場(chǎng)中的行為(用離心機(jī)中的光學(xué)系統(tǒng)連續(xù)監(jiān)測(cè)),能推斷物質(zhì)的純度,、形狀和分子量等,。分析性離心機(jī)都是超速離心機(jī)。
1.制備性離心機(jī)可分為三類:
?、牌胀x心機(jī):zui大轉(zhuǎn)速6000rpm左右,,zui大相對(duì)離心力近6000×g,容量為幾十毫升幾升,,分離形式是固液沉降分離,,轉(zhuǎn)子有角式和外擺式,其轉(zhuǎn)速不能?chē)?yán)格控制,,通常不帶冷凍系統(tǒng),,于室溫下操作,用于收集易沉降的大顆粒物質(zhì),如紅血球,、酵母細(xì)胞等,。這種離心機(jī)多用交流整流子電動(dòng)機(jī)驅(qū)動(dòng),電機(jī)的碳刷易磨損,,轉(zhuǎn)速是用電壓調(diào)壓器調(diào)節(jié),,起動(dòng)電流大,速度升降不均勻,,般轉(zhuǎn)頭是置于個(gè)硬質(zhì)鋼軸上,,因此地平衡離心管及內(nèi)容物就為重要,否則會(huì)損壞離心機(jī),。
?、聘咚倮鋬鲭x心機(jī):zui大轉(zhuǎn)速為20000~25000rpm(r/min),,zui大相對(duì)離心力為89000×g,,zui大容量可達(dá)3升,,分離形式也是固液沉降分離,轉(zhuǎn)頭配有各種角式轉(zhuǎn)頭,、蕩平式轉(zhuǎn)頭、區(qū)帶轉(zhuǎn)頭,、垂直轉(zhuǎn)頭和大容量連續(xù)流動(dòng)式轉(zhuǎn)頭,、般都有制冷系統(tǒng),以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之間摩擦而產(chǎn)生的熱量,,離心室的溫度可以調(diào)節(jié)和維持在0~40C,,轉(zhuǎn)速、溫度和時(shí)間都可以嚴(yán)格準(zhǔn)確地控制,,并有指針或數(shù)字顯示,,通常用于微生物菌體、細(xì)胞碎片,、大細(xì)胞器,、硫銨沉淀和免疫沉淀物等的分離純化工作,但不能有效地沉降病毒,、小細(xì)胞器如核蛋白體或單個(gè)分子,。
⑶超速離心機(jī):轉(zhuǎn)速可達(dá)50000~80000rpm,,相對(duì)離心力zui大可達(dá)510000×g,,zui的生產(chǎn)廠商有美的貝克曼公司和日本的日立公司等,離心容量由幾十毫升2升,,分離的形式是差速沉降分離和密度梯度區(qū)帶分離,,離心管平衡允許的誤差要小于0.1克。超速離心機(jī)的出現(xiàn),使生物科學(xué)的研究域有了新的擴(kuò)展,,它能使過(guò)去在電子顯微鏡觀察到的亞細(xì)胞器得到分級(jí)分離,,還可以分離病毒、核酸,、蛋白質(zhì)和多糖等,。
超速離心機(jī)主要由驅(qū)動(dòng)和速度控制、溫度控制,、真空系統(tǒng)和轉(zhuǎn)頭四部分組成,。超速離心機(jī)的驅(qū)動(dòng)裝置是由水冷或風(fēng)冷電動(dòng)機(jī)通過(guò)精密齒輪箱或皮帶變速,或直接用變頻感應(yīng)電機(jī)驅(qū)動(dòng),,并由微機(jī)進(jìn)行控制,,由于驅(qū)動(dòng)軸的直徑較細(xì),因而在旋轉(zhuǎn)時(shí)此細(xì)軸可有定的彈性彎曲,,以適應(yīng)轉(zhuǎn)頭輕度的不平衡,,而不致于引起震動(dòng)或轉(zhuǎn)軸損傷,除速度控制系統(tǒng)外,,還有個(gè)過(guò)速保護(hù)系統(tǒng),,以防止轉(zhuǎn)速超過(guò)轉(zhuǎn)頭zui大規(guī)定轉(zhuǎn)速而引起轉(zhuǎn)頭的撕裂或爆炸,為此,,離心腔用能承受此種爆炸的裝甲鋼板密閉,。
溫度控制是由安裝在轉(zhuǎn)頭下面的紅外線射量感受器直接并連續(xù)監(jiān)測(cè)離心腔的溫度,以保證準(zhǔn)確靈敏的溫度調(diào)控,,這種紅外線溫控比高速離心機(jī)的熱電偶控制裝置敏感,,準(zhǔn)確。
超速離心機(jī)裝有真空系統(tǒng),,這是它與高速離心機(jī)的主要區(qū)別,。離心機(jī)的速度在2000rpm以下時(shí),空氣與旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭之間的磨擦只產(chǎn)生少量的熱,,速度超過(guò)20000rpm時(shí),,由磨擦產(chǎn)生的熱量顯著增大,當(dāng)速度在40000rpm以上時(shí),,由磨擦產(chǎn)生的熱量就成為嚴(yán)重問(wèn)題,,為此,將離心腔密封,,并由機(jī)械泵和擴(kuò)散泵串聯(lián)工作的真空泵系統(tǒng)抽成真空,,溫度的變化容易控制,磨擦力很小,,這樣才能達(dá)到所需的超高轉(zhuǎn)速,。
2.轉(zhuǎn)頭:
?、沤鞘睫D(zhuǎn)頭:角式轉(zhuǎn)頭是指離心管腔與轉(zhuǎn)軸成定傾角的轉(zhuǎn)頭。它是由塊完整的金屬制成的,,其上有4~12個(gè)裝離心管用的機(jī)制孔穴,,即離心管腔,孔穴的中心軸與旋轉(zhuǎn)軸之間的角度在20~40度之間,,角度越大沉降越結(jié)實(shí),,分離效果越好。這種轉(zhuǎn)頭的優(yōu)點(diǎn)是具有較大的容量,,且重心低,,運(yùn)轉(zhuǎn)平衡,壽命較長(zhǎng),,顆粒在沉降時(shí)先沿離心力方向撞向離心管,,然后再沿管壁滑向管底,因此管的側(cè)就會(huì)出現(xiàn)顆粒沉積,,此現(xiàn)象稱為“壁效應(yīng)”,,壁效應(yīng)容易使沉降顆粒受突然變速所產(chǎn)生的對(duì)流擾亂,影響分離效果,。
?、剖幤绞睫D(zhuǎn)頭:這種轉(zhuǎn)頭是由吊著的4或6個(gè)自由活動(dòng)的吊桶(離心套管)構(gòu)成。當(dāng)轉(zhuǎn)頭靜止時(shí),,吊桶垂直懸掛,,當(dāng)轉(zhuǎn)頭轉(zhuǎn)速達(dá)到每分鐘200到800轉(zhuǎn)時(shí),吊桶蕩水平位置,,這種轉(zhuǎn)頭做密度梯度區(qū)帶離心,其優(yōu)點(diǎn)是梯度物質(zhì)可放在保持垂直的離心管中,,離心時(shí)被分離的樣品帶垂直于離心管縱軸,,而不像角式轉(zhuǎn)頭中樣品沉淀物的界面與離心管成定角度,因而有利于離心結(jié)束后由管內(nèi)分層取出已分離的各樣品帶,。其缺點(diǎn)是顆粒沉降距離長(zhǎng),,離心所需時(shí)間也長(zhǎng)。
?、菂^(qū)帶轉(zhuǎn)頭:區(qū)帶轉(zhuǎn)頭無(wú)離心管,,主要由個(gè)轉(zhuǎn)子桶和可旋開(kāi)的頂蓋組成,轉(zhuǎn)子桶中裝有十字型隔板裝置,,把桶內(nèi)分隔成四個(gè)或多個(gè)扇形小室,,隔板內(nèi)有導(dǎo)管,梯度液或樣品液從轉(zhuǎn)頭中央的進(jìn)液管泵入,,通過(guò)這些導(dǎo)管分布到轉(zhuǎn)子四周,,轉(zhuǎn)頭內(nèi)的隔板可保持樣品帶和梯度介質(zhì)的穩(wěn)定。沉降的樣品顆粒在區(qū)帶轉(zhuǎn)頭中的沉降情況不同于角式和外擺式轉(zhuǎn)頭,在徑向的散射離心力作用下,,顆粒的沉降距離不變,,因此區(qū)帶轉(zhuǎn)頭的“壁效應(yīng)”小,可以避免區(qū)帶和沉降顆粒的紊亂,,分離效果好,,而且還有轉(zhuǎn)速高,容量大,,回收梯度容易和不影響分辨率的優(yōu)點(diǎn),,使超離心用于制備和工業(yè)生產(chǎn)成為可能。區(qū)帶轉(zhuǎn)頭的缺點(diǎn)是樣品和介質(zhì)直接接觸轉(zhuǎn)頭,,耐腐蝕要求高,,操作復(fù)雜。
?、却怪鞭D(zhuǎn)頭:其離心管是垂直放置,,樣品顆粒的沉降距離zui短,離心所需時(shí)間也短,,適合用于密度梯度區(qū)帶離心,,離心結(jié)束后液面和樣品區(qū)帶要作九十度轉(zhuǎn)向,因而降速要慢,。
?、蛇B續(xù)流動(dòng)轉(zhuǎn)頭:可用于大量培養(yǎng)液或提取液的濃縮與分離,轉(zhuǎn)頭與區(qū)帶轉(zhuǎn)頭類似,,由轉(zhuǎn)子桶和有入口和出口的轉(zhuǎn)頭蓋及附屬裝置組成,,離心時(shí)樣品液由入口連續(xù)流入轉(zhuǎn)頭,在離心力作用下,,懸浮顆粒沉降于轉(zhuǎn)子桶壁,,上清液由出口流出。
3.離心管:
離心管主要用塑料和不銹鋼制成,,塑料離心管常用材料有聚乙烯(PE),,聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,,其中PP管性能較好,。塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明(或半透明),硬度小,,可用穿刺法取出梯度,。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,,使用壽命短,。
不銹鋼管強(qiáng)度大,,不變形,能抗熱,,抗凍,,抗化學(xué)腐蝕。但用時(shí)也應(yīng)避免接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品,,如強(qiáng)酸,、強(qiáng)堿等。
塑料離心管都有管蓋,,離心前管蓋必須蓋嚴(yán),,倒置不漏液。管蓋有三種作用:
?、俜乐箻悠吠庑?。用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí),這點(diǎn)尤其重要,。②防止樣品揮發(fā),。③支持離心管,防止離心管變形,。
4.分析性離心機(jī):
分析性離心機(jī)使用了特殊設(shè)計(jì)的轉(zhuǎn)頭和光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng),,以便連續(xù)地監(jiān)視物質(zhì)在個(gè)離心場(chǎng)中的沉降過(guò)程。從而確定其物理性質(zhì),。
分析性超速離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭是橢圓形的,,以避免應(yīng)力集中于孔處。此轉(zhuǎn)頭通過(guò)個(gè)有柔性的軸聯(lián)接到個(gè)高速的驅(qū)動(dòng)裝置上,,轉(zhuǎn)頭在個(gè)冷凍的和真空的腔中旋轉(zhuǎn),,轉(zhuǎn)頭上有2~6個(gè)裝離心杯的小室,離心杯是扇形石英的,,可以上下透光,,離心機(jī)中裝有個(gè)光學(xué)系統(tǒng),在整個(gè)離心期間都能通過(guò)紫外吸收或折射率的變化監(jiān)測(cè)離心杯中沉降著的物質(zhì),,在預(yù)定的期間可以拍攝沉降物質(zhì)的照片,在分析離心杯中物質(zhì)沉降情況時(shí),,在重顆粒和輕顆粒之間形成的界面就像個(gè)折射的透鏡,,結(jié)果在檢測(cè)系統(tǒng)的照像底板上產(chǎn)生了個(gè)“峰”,由于沉降不斷進(jìn)行,,界面向前推進(jìn),,因此峰也移動(dòng),從峰移動(dòng)的速度可以計(jì)算出樣品顆粒的沉降速度,。
分析性超速離心機(jī)和主要特點(diǎn)就是能在短時(shí)間內(nèi),,用少量樣品就可以得到些重要信息,,能夠確定生物大分子是否存在,其大致的含量,,計(jì)算生物大分子的沉降系數(shù),,結(jié)合界面擴(kuò)散,估計(jì)分子的大小,,檢測(cè)分子的不均性及混合物中各組份的比例,,測(cè)定生物大分子的分子量,還可以檢測(cè)生物大分子的構(gòu)象變化等,。
制備性超速離心的分離方法:
1.差速沉降離心法:
這是zui普通的離心法,。即采用逐漸增加離心速度或低速和高速交替進(jìn)行離心,使沉降速度不同的顆粒,,在不同的離心速度及不同離心時(shí)間下分批分離的方法,。此法般用于分離沉降系數(shù)相差較大的顆粒。
差速離心先要選擇好顆粒沉降所需的離心力和離心時(shí)間,。當(dāng)以定的離心力在定的離心時(shí)間內(nèi)進(jìn)行離心時(shí),,在離心管底部就會(huì)得到zui大和zui重顆粒的沉淀,分出的上清液在加大轉(zhuǎn)速下再進(jìn)行離心,,又得到第二部分較大較重顆粒的沉淀及含較小和較輕顆粒的上清液,,如此多次離心處理,即能把液體中的不同顆粒較好地分離開(kāi),。此法所得的沉淀是不均的,,仍雜有其它成分,需經(jīng)過(guò)2~3次的再懸浮和再離心,,才能得到較純的顆粒,。
此法主要由于組織勻漿液中分離細(xì)胞器和病毒,其優(yōu)點(diǎn)是:操作簡(jiǎn)易,,離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開(kāi),,并可使用容量較大的角式轉(zhuǎn)子。缺點(diǎn)是:須多次離心,,沉淀中有夾帶,,分離效果差,不能次得到純顆粒,,沉淀于管底的顆粒受擠壓,,容易變性失活。
2.密度梯度區(qū)帶離心法(簡(jiǎn)稱區(qū)帶離心法):
區(qū)帶離心法是將樣品加在惰性梯度介質(zhì)中進(jìn)行離心沉降或沉降平衡,,在定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,,形成不同區(qū)帶的分離方法。此法的優(yōu)點(diǎn)是:①分離效果好,,可次獲得較純顆粒,;②適應(yīng)范圍廣,,能象差速離心法樣分離具有沉降系數(shù)差的顆粒,又能分離有定浮力密度差的顆粒,;③顆粒不會(huì)擠壓變形,,能保持顆粒活性,,并防止已形成的區(qū)帶由于對(duì)流而引起混合,。
此法的缺點(diǎn)是:①離心時(shí)間較長(zhǎng);②需要制備惰性梯度介質(zhì)溶液,;③操作嚴(yán)格,,不易掌握。
密度梯度區(qū)帶離心法又可分為兩種:
?。?)差速區(qū)帶離心法:當(dāng)不同的顆粒間存在沉降速度差時(shí)(不需要像差速沉降離心法所要求的那樣大的沉降系數(shù)差),。在定的離心力作用下,顆粒各自以定的速度沉降,,在密度梯度介質(zhì)的不同區(qū)域上形成區(qū)帶的方法稱為差速區(qū)帶離心法,。此法用于分離有定沉降系數(shù)差的顆粒(20%的沉降系數(shù)差或少)或分子量相差3倍的蛋白質(zhì),與顆粒的密度無(wú)關(guān),,大小相同,,密度不同的顆粒(如線粒體,溶酶體等)不能用此法分離,。
離心管先裝好密度梯度介質(zhì)溶液,,樣品液加在梯度介質(zhì)的液面上,離心時(shí),,由于離心力的作用,,顆粒離開(kāi)原樣品層,按不同沉降速度向管底沉降,,離心定時(shí)間后,,沉降的顆粒逐漸分開(kāi),zui后形成系列界面清楚的不連續(xù)區(qū)帶,,沉降系數(shù)越大,,往下沉降越快,所呈現(xiàn)的區(qū)帶也越低,,離心必須在沉降z(mì)ui快的大顆粒到達(dá)管底前結(jié)束,,樣品顆粒的密度要大于梯度介質(zhì)的密度。梯度介質(zhì)通常用蔗糖溶液,,其zui大密度和濃度可達(dá)1.28kg/cm3和60%,。
此離心法的關(guān)鍵是選擇合適的離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間
?。?)等密度區(qū)帶離心法:離心管中預(yù)先放置好梯度介質(zhì),,樣品加在梯度液面上,,或樣品預(yù)先與梯度介質(zhì)溶液混合后裝入離心管,通過(guò)離心形成梯度,,這就是預(yù)形成梯度和離心形成梯度的等密度區(qū)帶離心產(chǎn)生梯度的二種方式,。
離心時(shí),樣品的不同顆粒向上浮起,,直移動(dòng)到與它們的密度相等的等密度點(diǎn)的特定梯度位置上,,形成幾條不同的區(qū)帶,這就是等密度離心法,。體系到達(dá)平衡狀態(tài)后,,再延長(zhǎng)離心時(shí)間和提高轉(zhuǎn)速已無(wú)意義,處于等密度點(diǎn)上的樣品顆粒的區(qū)帶形狀和位置均不再受離心時(shí)間所影響,,提高轉(zhuǎn)速可以縮短達(dá)到平衡的時(shí)間,,離心所需時(shí)間以zui小顆粒到達(dá)等密度點(diǎn)(即平衡點(diǎn))的時(shí)間為基準(zhǔn),有時(shí)長(zhǎng)達(dá)數(shù)日,。
等密度離心法的分離效率取決于樣品顆粒的浮力密度差,,密度差越大,分離效果越好,,與顆粒大小和形狀無(wú)關(guān),,但大小和形狀決定著達(dá)到平衡的速度、時(shí)間和區(qū)帶寬度,。
等密度區(qū)帶離心法所用的梯度介質(zhì)通常為氯化CSCl,,其密度可達(dá)1.7g/cm3。此法可分離核酸,、亞細(xì)胞器等,,也可以分離復(fù)合蛋白質(zhì),但簡(jiǎn)單蛋白質(zhì)不適用,。
收集區(qū)帶的方法有許多種,,例如:
(1)用注射器和滴管由離心管上部吸出,。
?。?)有針刺穿離心管底部滴出。
?。?)用針刺穿離心管區(qū)帶部份的管壁,,把樣品區(qū)帶抽出。
?。?)用根細(xì)管插入離心管底,,泵入超過(guò)梯度介質(zhì)zui大密度的取代液,將樣品和梯度介質(zhì)壓出,,用自動(dòng)部分收集器收集,。
離心操作的注意事項(xiàng)
高速與超速離心機(jī)是生化實(shí)驗(yàn)教學(xué)和生化科研的重要精密設(shè)備,,因其轉(zhuǎn)速高,產(chǎn)生的離心力大,,使用不當(dāng)或缺乏定期的檢修和保養(yǎng),,都可能發(fā)生嚴(yán)重事故,因此使用離心機(jī)時(shí)都必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,。
1.使用各種離心機(jī)時(shí),,必須事先在天平上精密地平衡離心管和其內(nèi)容物,平衡時(shí)重量之差不得超過(guò)各個(gè)離心機(jī)說(shuō)明書(shū)上所規(guī)定的范圍,,每個(gè)離心機(jī)不同的轉(zhuǎn)頭有各自的允許差值,,轉(zhuǎn)頭中不能裝載單數(shù)的管子,當(dāng)轉(zhuǎn)頭只是部分裝載時(shí),,管子必須互相對(duì)稱地放在轉(zhuǎn)頭中,,以便使負(fù)載均勻地分布在轉(zhuǎn)頭的周?chē)?br /> 2.裝載溶液時(shí),要根據(jù)各種離心機(jī)的具體操作說(shuō)明進(jìn)行,,根據(jù)待離心液體的性質(zhì)及體積選用適合的離心管,,有的離心管無(wú)蓋,液體不得裝得過(guò)多,,以防離心時(shí)甩出,,造成轉(zhuǎn)頭不平衡、生銹或被腐蝕,,而制備性超速離心機(jī)的離心管,,則常常要求必須將液體裝滿,以免離心時(shí)塑料離心管的上部凹陷變形,。每次使用后,,必須仔細(xì)檢查轉(zhuǎn)頭,及時(shí)清洗,、擦干,,轉(zhuǎn)頭是離心機(jī)中須重點(diǎn)保護(hù)的部件,搬動(dòng)時(shí)要小心,,不能碰撞,,避免造成傷痕,轉(zhuǎn)頭長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí),,要涂上層上光臘保護(hù),,嚴(yán)禁使用顯著變形、損傷或老化的離心管,。
3.若要在低于室溫的溫度下離心時(shí),。轉(zhuǎn)頭在使用前應(yīng)放置在冰箱或置于離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭室內(nèi)預(yù)冷。
4.離心過(guò)程中不得隨意離開(kāi),應(yīng)隨時(shí)觀察離心機(jī)上的儀表是否正常工作,,如有異常的聲音應(yīng)立即停機(jī)檢查,,及時(shí)排除故障。
5.每個(gè)轉(zhuǎn)頭各有其zui高允許轉(zhuǎn)速和使用累積*,,使用轉(zhuǎn)頭時(shí)要查閱說(shuō)明書(shū),不得過(guò)速使用,。每轉(zhuǎn)頭都要有份使用檔案,,記錄累積的使用時(shí)間,若超過(guò)了該轉(zhuǎn)頭的zui高使用*,,則須按規(guī)定降速使用,。