液相色譜日常維護(hù)---流動(dòng)相知識(shí)
a.采用“HPLC"級(jí)溶劑
b.避免使用會(huì)引起柱效損失或保留特性變化的溶劑
c.對(duì)試樣有適宜的溶解度
d.化學(xué)穩(wěn)定性要好
e.溶劑粘度要低
a.純化水(娃哈哈純凈水,屈臣氏蒸餾水)
b.蒸餾水
c.去離子水
a.專(zhuān)門(mén)的純水機(jī)或超純水機(jī):理想的HPLC水應(yīng)為18.2MΩ的超純水,,并通過(guò)0.22um的濾膜,除去熱源,,有機(jī)物,無(wú)機(jī)離子等
b.去離子水重蒸
c.市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)娃哈哈純凈水,,屈臣氏蒸餾水
a.經(jīng)過(guò)了蒸餾和0.45u的過(guò)濾(除纖維毛,,未溶解的機(jī)械顆粒)
b.不含防腐劑和抗氧化劑
c.除去了有紫外吸收的雜質(zhì) 常用溶劑及紫外截止波長(zhǎng)
a.使用前必須過(guò)濾
b.使用前必須先用相同比例(甲醇比例相同)的甲醇水溶液沖洗柱子,,防止緩沖鹽的析出
c.使用后一定要進(jìn)行清洗,以免造成腐蝕,、磨損、阻塞:用高比例水相的甲醇水溶液沖洗40min(1mL/min),,再用甲醇沖洗30min
d.用純水沖洗泵頭清洗管路
e.易受到細(xì)菌和霉菌的影響,,最好現(xiàn)配現(xiàn)用
a.過(guò)濾掉流動(dòng)相中固體顆粒和微生物,,防止堵塞儀器和色譜柱
b.使用≤0.45um的過(guò)濾膜:水/水溶液---水系膜,,有機(jī)溶劑---有機(jī)膜
現(xiàn)象:管路中不斷有氣泡生成
措施:采用異丙醇(或5%稀硝酸)超聲波清洗,,再用蒸餾水清洗
除去流動(dòng)相中溶解或因混合而產(chǎn)生的氣泡
氣泡對(duì)測(cè)定的影響: 泵中氣泡使液流波動(dòng),改變保留時(shí)間和峰面積
柱中氣泡使流動(dòng)相繞流,,峰變形
檢測(cè)器中的氣泡產(chǎn)生基線波動(dòng)
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