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KlenTaq-S 測序酶

公司名稱：
更新時間：
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瀏覽次數：

上海起發(fā)實驗試劑有限公司
2024-09-03 16:37:47
上海市
1208

【簡單介紹】

品牌	BIOHUB	供貨周期	兩周

KlenTaq-S 測序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版,，為 Taq DNA 聚合酶的大片段，并做了基因突變,。本酶具有 5’→3’聚合酶活性,，無5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。

【詳細說明】

本公司 KlenTaq-S 測序酶是重組表達,，并經多步純化制備的重組蛋白,。

活性定義活性單位指在 72℃下， 1×AM PCR Buffer 1,，30 min 內將 10 nmole dNTP 摻入酸不溶性物質所需的酶量,。特點

1.尤其適合 ddNTP 等修飾核苷酸的摻入反應

2.相比全長 Taq DNA 聚合酶，本酶比活性有所降低

適用范圍

ddNTP 終止法DNA 測序（一代測序）

焦磷酸解反應延伸法 SNP 分析

質量控制

經過嚴格的質控檢測,，確保該產品具有最高的活性和純度,。

酶貯存緩沖液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

應用舉例

以下反應舉例為 50 μl 標準 PCR 體系，僅供參考,。實際 PCR 條件應根據模板,、引物、目的片段大小加以優(yōu)化,，確定最佳反應條件,。

1）按下表配制反應體系

組份	體積/μl	終濃度
10×AM PCR Buffer 1	5	1×
dNTPs（2.0 mM）	5	0.2 mM
引物 F（10 μM）	1.5	0.3 μM
引物R（10 μM）	1.5	0.3 μM
Template	Varable*	/
KlenTaq-S測序酶（5U/μl）	0.5	2.5U
ddH2O	Varable	/
總體積	50	/

*模板DNA用量參數(50 μl反應體系):

人基因組DNA100-1000 ng ; 微生物基因組DNA 10-100ng；PCR產物 1 ng-10 ng,； Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl ,。

2）按如下條件進行反應，

95℃	2-5 min
95℃	15 sec	25-35 Cycles
55~72℃	20 sec
72℃	1kb/min
72℃	5 min

3）瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR 產物,，或按實驗目的進行后續(xù)操作,。

注意事項1.PCR 條件和野生型 Taq DNA 聚合酶類似，對特定 DNA 的測序反應可能需要優(yōu)化,。2.本酶擴增能力較野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低,，PCR 產量有所降低，不建議用于常規(guī) PCR,。3.不可用于 Taqman 探針法 q-PCR,。


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