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BioGenes—新一代宿主細(xì)胞殘留蛋白（HCP）ELISA檢測試劑盒

準(zhǔn)確定量檢測殘留的宿主細(xì)胞殘留蛋白（HCP）是病毒性疫苗或基因工程產(chǎn)品生產(chǎn)的關(guān)鍵質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),。BioGenes公司優(yōu)化的360 - HCP檢測試劑盒檢測宿主細(xì)胞蛋白(HCP)比傳統(tǒng)檢測具有顯著的優(yōu)勢。通過提供四個試劑盒包（每個包使用不同的anti-HCP抗體）,，通過比較選取zui適檢測試劑盒檢測HCP,，增加了HCP檢出的特異性和靈敏度。因此可zui大限度的減少了anti-HCP抗體不能*檢測終產(chǎn)品中HCP的可能性,。而傳統(tǒng)的HCP檢測只是使用一個抗體進(jìn)行檢測，因此增加了部分HCP不能檢出的可能性,。

BioGenes產(chǎn)品說明書：

1,、CHO|360-HCP ELISA

CHO|360-HCP ELISA是為中國倉鼠卵巢細(xì)胞（CHO）作為宿主細(xì)胞的生物制品進(jìn)行HCP檢測的試劑盒，擁有高度特異性和靈敏度,，覆蓋率更多的CHO蛋白譜,。

通過用模擬轉(zhuǎn)染CHO-K1和 CHO-S細(xì)胞的HCP免疫家兔或山羊，然后結(jié)合BioGenes公司*的抗原和抗體制備技術(shù)（優(yōu)化的蛋白純化技術(shù)）得到HCP多克隆抗體,。使用事先準(zhǔn)備好的不同抗原（總HCP或分級HCP）每個分級HCP分別用于免疫動物,，因而得到四個不同HCP ELISA檢測試劑盒(A到D),，這四個試劑盒共同組成360 - HCPHCP ELISA檢測體系。

HCP超級檢出率：

CHO|360-HCP ELISA試劑盒經(jīng)大量的模擬CHO-HCP樣本檢測測試,。在大多數(shù)情況下可以從四個檢測試劑盒中找出*的HCP檢出率的試劑盒,。如上圖樣本4可以看出，D型試劑盒可以檢出大于90%的HCP,，比ABC三種類型更為適用于該樣本,，而普通商業(yè)化的檢測試劑盒只能檢出約20%的HCP。

更高的檢測特異性：

LOD：0.5 – 1.0 ng/mL

LOQ ：2 – 3 ng/mL

檢出范圍：2 – 100 ng/mL

2,、E.coli|360-HCP ELISA

E.coli |360-HCP ELISA是為大腸桿菌（E.coli）作為宿主細(xì)胞的生物制品進(jìn)行HCP檢測的試劑盒,，擁有高度特異性和靈敏度，覆蓋率更多的E.coli蛋白譜,。

E.coli|360-HCP Assay試劑盒是利用在不同培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下發(fā)酵的W3110和BL21(DE3) 細(xì)胞株產(chǎn)生四種具有不同HCP蛋白譜的抗原,。然后用這四種抗原免疫山羊得到四種不同的HCP ELISAs試劑盒(A到D)，四者共同構(gòu)成E.coli|360-HCP Assay 檢測體系,?？赏ㄟ^考馬斯染色E.coli的 HCP和不同抗體的2D western blotting 檢測確定zui高特異性的試劑盒。

HCP超級檢出率：

E.coli |360-HCP ELISA試劑盒經(jīng)大量的模擬大腸桿菌-HCP樣本檢測測試,。如上圖可以看出,，可以看出，B型試劑盒可以檢出樣本1中大于 80%的HCP,，A型試劑盒是樣本2和3的*檢測試劑盒,，而樣本5的*檢測試劑盒是D型試劑盒。

更高的檢測特異性：

LOD：0.5 – 1.0 ng/mL

LOQ ：2 – 3 ng/mL

檢出范圍：2 – 100 ng/mL

3,、*試劑盒選擇的方法：

如實(shí)驗(yàn)中選取中國倉鼠卵巢細(xì)胞（CHO）作為宿主細(xì)胞,，則選擇CHO|360-HCP ELISA試劑盒進(jìn)行HCP檢測；如實(shí)驗(yàn)中選取大腸桿菌（E.coli）作為宿主細(xì)胞,，則選擇E.coli |360-HCP ELISA試劑盒進(jìn)行HCP檢測,。然后根據(jù)以下方法對具體的試劑盒型號進(jìn)行選擇。

（1）預(yù)實(shí)驗(yàn)選取法：

該方法是采用The 360-HCP ELISAs Starter Set包（內(nèi)含A-D型四種不同的檢測試劑盒）,，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)選取zui適試劑盒類型進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),。實(shí)驗(yàn)流程如下圖：

（2）BioGenes公司鑒定服務(wù)推薦法

除上述客戶自行確定*試劑盒法外，BioGenes還提供試劑盒性能試驗(yàn)并推薦*試劑盒的服務(wù),。

方法1：

360-HCP ELISA kits (type A to D)檢測含HCP樣本,，流程為:

（1）客戶提供4-8個不同純化階段的樣本；

（2）兩次重復(fù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確定,；

（3）每個樣品多達(dá)4個稀釋倍數(shù),；

（4）BioGenes推薦一個*的ELISA檢測試劑盒類型，同時(shí)附一個簡短的推薦報(bào)告。

方法2：

2-D蛋白印記分析模擬的HCP：2-D蛋白印記分析可以獲得抗HCP抗體對存在于宿主細(xì)胞株中全部HCP的范圍評估信息,，以獲取確信的zui適抗體類型和水平,，流程為:

（1）2-D 分離和考馬斯藍(lán)銀染色和銀染；

（2）使用不同抗體稀釋度進(jìn)行免疫印跡,；

（3）完成包括蛋白范圍的報(bào)告,；

（4）推薦zui適ELISA檢測試劑盒類型，同時(shí)附一個簡短的推薦報(bào)告,。