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CANDOR LowCross-Buffer®產(chǎn)品指導
點擊次數(shù):3863 發(fā)布時間:2013-12-3
問題一:
在過氧化物標記的雙夾心elisa實驗中得到的背景值較高,,原因是什么,?LowCross-Buffer®能起到什么作用嗎,?
答復(fù):
了解二抗能否與其他哺乳動物的抗體結(jié)合是非常重要的,。除非是高度純化的抗體,,抗兔lgG的二抗也能夠與鼠lgG,,山羊lgG結(jié)合,,原因是哺乳動物抗體的高 度同源性,不經(jīng)過純化(預(yù)吸附)的二抗可以與其他抗體進行高親和性的交叉反應(yīng),,這種情況下,,LowCross-Buffer起不到作用,二抗必須不能與捕 獲抗體結(jié)合,,例如,,Biotrend可以提供各類避免此類交叉反應(yīng)的預(yù)吸附抗體。
問題二:
我需要對LowCross-Buffer®進行稀釋嗎,?
答復(fù):
是即用型的,。樣品或檢測抗體直接用此稀釋,僅僅在競爭性實驗或一些免疫組化實驗中,,可以用水或一些生理緩沖液對其進行稀釋,。在這種情況下,實驗者要通過測試找到合適的比例,。
問題三:
LowCross-Buffer®會對酶標檢測的顯色反應(yīng)產(chǎn)生影響嗎,?
答復(fù):
LowCross-Buffer®不會使堿性磷酸酶或過氧化物酶活性減弱。
有的用戶把酶標檢測抗體在LowCross-Buffer®孵育后會檢測到酶活性的增強,。
問題四:
LowCross Buffer®能用在熒光物質(zhì)結(jié)合物中嗎,?比如在蛋白芯片實驗中。
答復(fù):
是的,,可以用在蛋白芯片中,。對于青染料(如Cy5, Cy3,),,有的實驗中可觀察到熒光量的增強,。
問題五:
可以用于抗體或多克隆抗體嗎
答復(fù):
可以,不過在使用多抗時,,要注意到多抗中含有親和力不同的多種抗體,,LowCross-Buffer®僅允許高親和性的抗體結(jié)合而消除低親和性的結(jié)合,。使 用LowCross-Buffer®時可適當增加多抗的濃度,因為抗體濃度的增加也是高親和性抗體濃度的增加,,同時LowCross-Buffer®抑制 低親和性結(jié)合,。但是不是要加大抗體的濃度還要取決于抗體的純度。
問題六:
LowCross-Buffer®可以反復(fù)凍融嗎,?
答復(fù):
反復(fù)凍融幾次不會有影響,,但是在使用前要充分混勻。
問題七:
為什么LowCross-Buffer®能減少交叉反應(yīng),?
答復(fù):
我們所說的基質(zhì)效應(yīng)一般是一些基質(zhì)成分(如人血清標本中的血清蛋白)的與分析物或抗體的低親和性結(jié)合,。分析物會被標本中的蛋白或其他成分掩蔽掉而不能與抗體結(jié)合,抗體也可以被基質(zhì)掩蔽,。LowCross-Buffer®可以減少基質(zhì)對抗體的掩蔽,。
問題八:
LowCross-Buffer®可以用在哪些方面?
答復(fù):LowCross-Buffer®是一種新的用于免疫實驗(如ELISA,、WB,、蛋白芯片和免疫-PCR)的樣本緩沖液,有助于減少干擾作用,,如非特異性結(jié)合,,交叉反應(yīng)和基質(zhì)效應(yīng),抗原抗體的高親和結(jié)合不會被減弱,。
問題九
LowCross-Buffer®能替代表面封閉液嗎,?
答復(fù):
不行,LowCross-Buffer®不是表面封閉液,,你可以用它稀釋樣本和抗體,,我們推薦使用CANDOR的封閉液,能起到很好的封閉作用,。