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巨噬細(xì)胞去除實(shí)驗(yàn)
點(diǎn)擊次數(shù)：9908 發(fā)布時(shí)間：2013-7-9
去除巨噬細(xì)胞是研究巨噬細(xì)胞功能的重要方法。巨噬細(xì)胞可吞噬clodronate Liposome,，在溶酶體的作用下,，clodronate可釋放出來，當(dāng)其達(dá)到一定濃度時(shí),，可引起巨噬細(xì)胞的凋亡,，從而去除巨噬細(xì)胞。clodronate Liposome可局部注射去除注射部位臨近的巨噬細(xì)胞,，如肺,、膝關(guān)節(jié)、腫瘤局部和腦等,；也可尾靜脈或腹腔注射去除循環(huán)途徑中的單核巨噬細(xì)胞,，如肝臟和脾臟中的巨噬細(xì)胞。
1. 脂質(zhì)體的準(zhǔn)備
美國的FormuMax Scientific可以提供多種clodronate Liposome 具體產(chǎn)品可以上http://www.liposomeexpert.com查詢,，他們中國代理商是上海起福生物科技有限公司
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2. 脂質(zhì)體的體內(nèi)注射
隔日尾靜脈注射200ul clodronate liposome,，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求制定注射日程。通過免疫組化或流式檢測巨噬細(xì)胞的去除效率,。
尾靜脈注射方法：
1. 將小鼠放在倒扣的飯盒內(nèi),，從孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2條動(dòng)脈和3條靜脈，2條動(dòng)脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面,，3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側(cè)的靜脈,；
2. 將紗布浸泡于約70度的溫水中，拿出后包裹尾巴,，以達(dá)到使尾部血管擴(kuò)張及軟化表皮角質(zhì)的目的,；
3. 行尾部靜脈注射時(shí)，以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,，留出約
有的實(shí)驗(yàn)需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥,，注射部位應(yīng)盡可能從尾端開始，按次序向尾根部移動(dòng),，更換血管位置注射給藥,。拔出針頭后，用棉球按住注射部位輕壓1-2min,，止血,。