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技術(shù)文章
防止RNA的降解
點擊次數(shù):13027 發(fā)布時間:2012-3-9
對于RNA的抽提質(zhì)量影響至關(guān)重要的幾個因素之一,,是在RNA抽提之前如何處理樣本。
這里我們可以看到一個小鼠肝組織樣本在室溫下分別放置2小時,,4小時,,過夜之后提取的RNA電泳圖,。RNA在未處理的樣本中很快就降解了,。
你知道嗎?
內(nèi)源RNase量在不同種類組織中差異極大,。腦組織和心組織擁有相對zui低的內(nèi)源RNase,,胸腺組織和胰腺組織擁有比腦組織多100,000倍內(nèi)源RNase。
當(dāng)你著手樣本破裂均漿時,,請將以上因素考慮進(jìn)去,,能在獲得樣本的zui初時間將富含RNase的樣本放入RNAlater保存液,以便保存更少降解的樣本用于后繼破裂均漿,。
保護樣本免于RNase困擾
RNAlater是一種液態(tài),,無毒的組織儲藏試劑,能夠迅速滲透組織來穩(wěn)定和保護細(xì)胞RNA,。使用RNAlater您無需迅速處理組織樣品或液態(tài)凍結(jié)樣品以備后繼處理,。組織切割后浸沒入RNAlater中儲藏,不會損害后繼RNA分步驟所獲得的RNA質(zhì)量和數(shù)量,。
只需要方便地將樣品(組織,、細(xì)胞、土壤,、昆蟲,、植物等等)侵入5-10倍體積的RNAlater也中保存,,就可保護樣品內(nèi)RNA免于內(nèi)源RNAlater降解。大多數(shù)組織經(jīng)RNAlater處理后可以在室溫或低溫保存很長時間,,在-20°C/-80°C甚至無限長,。
提示
RNAlater是一種非特異的蛋白變性劑。在它的作用下不僅RNase被變性抑制從而保護RNA,,Dnase/核酸聚合酶/大多數(shù)蛋白酶同時被變性抑制,,因而同樣可以保護樣本中的DNA、表達(dá)譜和蛋白質(zhì)完整性,。
AM7020 | RNAlater | 100ml |
AM7021 | RNAlater | 550ml |