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技術(shù)文章
淋巴細胞分離液
點擊次數(shù):5388 發(fā)布時間:2012-1-14
淋巴細胞分離液
產(chǎn)品編號 | 包裝 | 價格 |
130010-L | 60ml | 86.00 |
130010-L1 | 120ml | 125.00 |
130010-L2 | 200ml | 190.00 |
淋巴細胞分離液是一種根據(jù)細胞密度差異,借助離心產(chǎn)生的重力加速度,,進行細胞的分離純化的常用試劑,。從外周血、骨髓,、外周淋巴器官或各種組織分離出來的細胞是多種細胞的混合物,,如要研究某種特定細胞的結(jié)構(gòu)、功能或表面標志等特征,,首先要分離純化細胞,。根據(jù)細胞的大小、密度,、表面荷電,、吸附能力或表面抗原的差異可實現(xiàn)對目的細胞的分離、純化,,常用的細胞分離與純化方法有密度梯度沉降法,、細胞電泳、貼附,、親和層析,、花環(huán)形成、補體介導殺傷溶解以及流式細胞儀(FCM)和免疫磁珠分選等,。密度梯度沉降法是根據(jù)細胞密度差異,,借助細胞分離液和離心,進行細胞分離純化的常用方法之一,。細胞分離液則是一類能產(chǎn)生一定程度的密度梯度,,高密度時粘度不高,濃度不同時滲透壓變化不大,,經(jīng)洗滌去除后能用于體外培養(yǎng),,而對細胞沒有毒性。zui常用的細胞分離液有Ficoll和Percoll,。Ficoll是蔗糖的多聚體,,呈中性,吸水性強,,平均分子量為400,000,,當密度為1.2g/ml仍未超出正常生理性滲透壓,也不穿過生物膜。紅細胞,、粒細胞比重大,,離心后沉于管底,;淋巴細胞和單核細胞的比重小于或等于分層液比重,離心后漂浮于分層液的液面上,,也可有少部分細胞懸浮在分層液中,。吸取分層液液面的細胞,就可從外周血中分離到單個核細胞,。
賽馳生物生產(chǎn)的淋巴細胞分離液(Lymphocytes Separation Medium)以Ficoll和泛影酸鈉為主原材料,,配制成密度為1.077的,無菌溶液,。該產(chǎn)品適用于人淋巴細胞和大多數(shù)哺乳動物細胞的分離純化,,能除去紅細胞和死細胞碎片。
包裝清單
2-8℃避光保存,。
使用說明
1.在離心管中加入適量,。
2.取抗凝血(無溶血)與等量Hank’s液或平衡鹽溶液充分混勻,用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上,,注意保持兩液面界面清晰,,水平離心2000rpm×20分鐘。
3.離心后,,管內(nèi)液體分為三層,,上層為血漿和Hank’s液,,下層主要為紅細胞和粒細胞,。中層為,在中上層液面處有一白色云霧層狹窄帶,,即為富含淋巴細胞和單核細胞的單個核細胞(PBMC)及血小板,。
4.吸去zui上層的血漿,收集血漿層和交界面的單個核細胞,,盡量全部吸出PBMC,,移入一新的離心管中;
2.取抗凝血(無溶血)與等量Hank’s液或平衡鹽溶液充分混勻,用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上,,注意保持兩液面界面清晰,,水平離心2000rpm×20分鐘。
3.離心后,,管內(nèi)液體分為三層,,上層為血漿和Hank’s液,,下層主要為紅細胞和粒細胞,。中層為,在中上層液面處有一白色云霧層狹窄帶,,即為富含淋巴細胞和單核細胞的單個核細胞(PBMC)及血小板,。
4.吸去zui上層的血漿,收集血漿層和交界面的單個核細胞,,盡量全部吸出PBMC,,移入一新的離心管中;
5.加入Hanks’液或無血清培養(yǎng)液,,混勻后離心200×g 10分鐘,,棄去上清液(低速離心有利于去除細胞懸液中留存的血小板)。
6.再用同樣洗滌液洗滌細胞2次,,每次離心500×g 10分鐘,,以洗去殘留的。再用細胞培養(yǎng)液將細胞調(diào)配成適當濃度,。通常,,每毫升外周血可得1~2×106PBMC
產(chǎn)品編號 | 130010-L | 130010-L1 | 130010-L2 |
60ml | 120ml | 200ml | |
說明書 | 1 份 |
保存條件