QQ交談
您所在位置：請輸入產(chǎn)品關(guān)鍵字：
郵編：201203
聯(lián)系人：楊經(jīng)理
電話：021-50724187 021-50724961
傳真：021-50724961
手機：15921799099
留言：發(fā)送留言
個性化：www.qfbio.com
網(wǎng)址：www.qfbio.com
商鋪：http://sorrent.com.cn/st178406/
Miltenyi磁柱選擇及標(biāo)記問題
點擊次數(shù)：3732 發(fā)布時間：2011-10-11
一,、標(biāo)記策略
用MACS進行磁分離,，zui重要的參數(shù)就是高質(zhì)量的標(biāo)記。對陽性細胞的標(biāo)記應(yīng)盡可能強,，而背景要盡可能低,，才能獲得對磁標(biāo)記的陽性細胞和未標(biāo)記的陰性細胞的分辨。有多種不同的標(biāo)記策略可供參考：
1,、直接標(biāo)記
直接標(biāo)記是zui快速和zui特異的磁標(biāo)記方法,。
2、間接標(biāo)記
幾乎所有的單克隆抗體或多克隆抗體都可以用于間接標(biāo)記,。用無標(biāo)記的,、生物素化的或FITC、PE或APC結(jié)合的一抗標(biāo)記細胞,，再用抗免疫球蛋白,、抗生物素、鏈霉菌親和素,、抗FITC,、抗PE、或抗APC的微珠分別進行磁標(biāo)記,。間接標(biāo)記可以放大磁標(biāo)記,，用于分離表達比較弱的標(biāo)記很有用。在間接標(biāo)記中,，以使用生物素化的或PE表記的一抗結(jié)果特異性,。
二、磁分離柱的選擇
下表為德國Miltenyi公司的分離柱種類,，其中 MS, LS, XS柱適合于正性細胞選擇,，如果磁標(biāo)記很強，也可用于負性選擇,。Large Cell Columns與MS柱相比,，孔徑較大，適合于人和動物大細胞的正性選擇,，如巨核細胞,。新的LD柱是為zui方便的負選設(shè)計，代替了AS 和BS柱,。LD 柱和CD及D柱即使在磁標(biāo)記很弱的情況下也能獲得zui高的負選效率,。µ 和M柱是為分子生物學(xué)方面的應(yīng)用而設(shè)計的。
三,、分選策略
分選策略也要根據(jù)實際情況進行選擇
1,、正性選擇（positive selection）
磁珠對細胞功能和活力的影響很小,，因此一般首先應(yīng)該考慮正選策略。正選具有速度快和單克隆抗體的特異性優(yōu)勢,，大多數(shù)情況下,，正選省時省錢。
2,、負性選擇（negative selection）
如果正選策略不適合您的實驗,，比如有可能因抗體結(jié)合引起細胞活化或沒有針對靶細胞的特異性抗體，可以選擇負選策略,。MACS
附：Miltenyi分離柱技術(shù)指標(biāo)及圖片
