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Cygnus產(chǎn)品及應(yīng)用選擇指南
點擊次數(shù):5484 發(fā)布時間:2011-10-7
Cygnus產(chǎn)品及應(yīng)用選擇指南 : | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
部分藥品來源于生物組織,但產(chǎn)量有限,,所以其價格十分昂貴,。微生物/細(xì)胞生長迅速,,容易控制,,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。利用基因工程將合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),,讓其產(chǎn)生相應(yīng)的藥物,,不但能解決產(chǎn)量問題,還能大大降低生產(chǎn)成本,。 基因工程圖
基因工程大大改變了現(xiàn)有制藥生產(chǎn)的狀況,,但是基因工程產(chǎn)品中殘留的宿主細(xì)胞蛋白是影響制品純度的重要因素,反復(fù)使用含宿主細(xì)胞蛋白的基因工程制品有可能引起機體的過敏反應(yīng),。目前應(yīng)用于人類疾病治療或疾病預(yù)防的基因工程主要采用中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO)作為宿主細(xì)胞。因制品中細(xì)胞蛋白殘留量低 ,用常規(guī)的理化方法無法檢測,為此需要建立細(xì)胞蛋白殘留量測定方法,對半成品進行檢定,從而更有效地保證制品的質(zhì)量 ,提高制品的安全性,。 Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測的一系列產(chǎn)品,。生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物,諸如特殊重組表達系統(tǒng)中宿主細(xì)胞蛋白( Host Cell protein, HCP )的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物,。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測生物工程殘留物的產(chǎn)品,, Cygnus公司檢測產(chǎn)品覆蓋了常用于基因工程的培養(yǎng)細(xì)胞以及一些用于細(xì)胞培養(yǎng)的添加物。CHO細(xì)胞即中國倉鼠卵巢細(xì)胞(Chinese hamster ovary),,該細(xì)胞具有不死性,,可以傳代百代以上,是目前生物工程上廣泛培養(yǎng)的細(xì)胞,。*批準(zhǔn)正式應(yīng)用于人類疾病治療或疾病預(yù)防的基因工程產(chǎn)品約有三十多種,,其中只有一種(乙肝疫苗)是由酵母菌生產(chǎn)的,其余所有產(chǎn)品都是由CHO細(xì)胞和大腸桿菌生產(chǎn)的,,大腸桿菌不能形成有活性的二聚體(如白介素2),,也不具有糖基化的功能(如EPO),而CHO卻具有如上的功能,,因此CHO成為表達復(fù)雜生物大分子的理想宿主,。另外CH0細(xì)胞在基因工程使用中還有一個優(yōu)點,該細(xì)胞屬于成纖維細(xì)胞(fibroblast),,是一種非分泌型細(xì)胞,,它本身很少分泌CHO內(nèi)源蛋白,因而檢測起來很困難,。 ![]() 一,、 Cygnus Elisa檢測產(chǎn)品 共有39種Elisa 檢測試劑盒,包括原核,、真核表達細(xì)胞宿主蛋白檢測試劑盒,,細(xì)胞培養(yǎng)殘留物檢測試劑盒等。 公司產(chǎn)品:
1.CHO HCP ELISA kit(F015) zui常用的用于檢測中國倉鼠卵巢細(xì)胞宿主蛋白試劑盒,。 1)CHO HCP ELISA kit(F015)盒子組成
2)操作流程(中文操作流程僅供參考,,實驗請參照原裝英文說明書) 客戶可以根據(jù)檢測靈敏度的需要,,選擇其中一種檢測方法,。
兩種操作方法的比較:
2. E.coli HCP ELISA kit(F410) 針對利用E.coli生產(chǎn)相關(guān)藥物的客戶,檢測大腸桿菌宿主蛋白殘留物的利器,。 1)E.coli HCP ELISA kit(F410)盒子組成 2)操作流程(中文操作流程僅供參考,,實驗請參照原裝英文說明書)
3. Pichia pastoris HCP ELISA kit(F140) 真核表達系統(tǒng)(畢赤酵母)宿主細(xì)胞殘留物檢測試劑盒。 1)Pichia pastoris HCP ELISA kit盒子組成
2)兩種不同的操作流程
兩種操作方法的比較:
4. BSA ELISA kit (F030) 細(xì)胞培養(yǎng)添加物BSA的檢測試劑盒,。 1)BSA ELISA kit (F030)盒子組成
2)操作步驟
5. Protein A的檢測試劑盒 針對開發(fā)抗體藥,,檢測純化過程中殘留的Protein A,,也有其他相關(guān)應(yīng)用,分為三款F050,、F050H和F400,,其中F400是產(chǎn)品,是靈敏度zui高,、效果的檢測Protein A的試劑盒,。 1)三個試劑盒的組成
2)三個試劑盒的差別
二,、Cygnus WB檢測產(chǎn)品 WB也是檢測宿主細(xì)胞蛋白的手段,Cygnus的WB kits里的抗體跟相應(yīng)的Elisa Kits是一樣的,,WB kits里面包括酶標(biāo)抗體,、陽性抗原、酶底物和封閉濃縮液,,Cygnus的WB產(chǎn)品共有11種,。具體產(chǎn)品可以參照下列(http://www.cygnustechnologies.com/category/western-blot-kits.html ) 部分WB產(chǎn)品:
三、 Cygnus免疫學(xué)產(chǎn)品 免疫學(xué)產(chǎn)品全部是Elisa和WB盒子里面的相關(guān)產(chǎn)品,,提供抗體,、抗原濃縮液(對照/標(biāo)準(zhǔn)品)、緩沖液和洗滌液等,。 大部分抗體為山羊和兔來源,,偶有豬抗,抗體貨號有前后綴,,不同后綴代表的意思不同,。Cygnus抗體共有117種,眾多抗體產(chǎn)品參照下列*:http://www.cygnustechnologies.com/category/antibodies.html 抗體的前綴/后綴代表的意義: PA或者PG是IgG片段 AF是親和純化的抗體 AF-AP偶聯(lián)了AP的親和純化抗體 AF-B偶聯(lián)了生物素的親和純化抗體 AF-HRP是偶聯(lián)了HRP的親和純化抗體 下面為部分抗體產(chǎn)品:
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