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為什么動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)大都需要二氧化碳培養(yǎng)箱
動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要理想的氣體環(huán)境和適宜的pH環(huán)境,。氧氣和二氧化碳是細(xì)胞生存的必要條件。氧氣參與細(xì)胞的三羧酸循環(huán),,為細(xì)胞生存,、代謝與合成提供能量;二氧化碳既是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,,也是細(xì)胞生長(zhǎng)的必需成分,,同時(shí)又與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān),一般需要把細(xì)胞置于95%空氣和5%二氧化碳的氣體環(huán)境和微堿性的環(huán)境中才能有利于細(xì)胞生長(zhǎng),。
大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞需要微堿性的環(huán)境,,適宜的pH范圍往往是7.2~7.4,而在細(xì)胞的培養(yǎng)過程中,,細(xì)胞代謝的二氧化碳增多,,培養(yǎng)液會(huì)逐漸變?yōu)樗嵝?/strong>,而細(xì)胞代謝的其他物質(zhì)也可能會(huì)使得培養(yǎng)液在一段時(shí)間內(nèi)過于堿性,,這都不利于細(xì)胞正常生長(zhǎng),,因此需要有pH緩沖系統(tǒng)來調(diào)節(jié)培養(yǎng)液中的pH穩(wěn)定,,就是碳酸鹽緩沖系統(tǒng),因?yàn)槠湟彩莿?dòng)物體內(nèi)最常見的生理pH緩沖系統(tǒng),,大多數(shù)培養(yǎng)液中會(huì)通過加入一定量的碳酸氫鈉來制造碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng),。
為了維持穩(wěn)定的pH,其實(shí)也就是維持HCO3- 含量的穩(wěn)定,,培養(yǎng)液需要保持在2-10%之間的二氧化碳?xì)怏w環(huán)境中,,而空氣中二氧化碳濃度只有0.04%左右,濃度很低,,這就需要使用二氧化碳培養(yǎng)箱(例如點(diǎn)成EC 160二氧化碳培養(yǎng)箱)來提供合適的環(huán)境條件,,二氧化碳培養(yǎng)箱不僅能夠在箱內(nèi)提供恒定的溫度條件和較高的相對(duì)濕度,還能控制二氧化碳?xì)怏w水平來控制培養(yǎng)基周圍環(huán)境中的二氧化碳濃度從而保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳濃度,,進(jìn)而間接維持培養(yǎng)液pH穩(wěn)定,。
如果不在二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)液中的HCO3- 將會(huì)被慢慢消耗殆盡,,培養(yǎng)液中的pH值也會(huì)發(fā)生變化,,這將不利細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。所以大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)往往都是需要用到二氧化碳培養(yǎng)箱,。
當(dāng)把二氧化碳培養(yǎng)箱中的細(xì)胞培養(yǎng)基由箱內(nèi)轉(zhuǎn)移到箱外時(shí),,培養(yǎng)基的周圍環(huán)境二氧化碳濃度降低了許多,此時(shí)碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)就會(huì)失去作用,,解決方法之一就是向培養(yǎng)基中添加其他不受二氧化碳環(huán)境影響的pH緩沖系統(tǒng)來增加pH緩沖能力,,例如HEPES緩沖系統(tǒng)等。
一般細(xì)胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間,。由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中重要的pH緩沖系統(tǒng)),,所以大多數(shù)培養(yǎng)液用它來保持穩(wěn)定的pH,。用粉末配制培養(yǎng)液時(shí),,常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。對(duì)大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言,,以為了維持穩(wěn)定的pH,,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度,。同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,,以便于氣體的交換。
是不是采用其他pH緩沖系統(tǒng)就不需要二氧化碳培養(yǎng)箱了呢,?人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低,,如果細(xì)胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液中的HCO3-會(huì)被耗盡,,這樣會(huì)影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng),。所以大部分動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),,還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。
在過去的數(shù)十年間,,細(xì)胞生物學(xué),、分子生物學(xué)、藥理學(xué)等的研究領(lǐng)域都有了驚人的長(zhǎng)足進(jìn)步,,同時(shí),,這些領(lǐng)域中的技術(shù)應(yīng)用也不得不跟上“腳步"。雖然典型的生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有了很大的改變,,但二氧化碳培養(yǎng)箱依然是實(shí)驗(yàn)室中的主要組成部分,,其使用的目的都是維持和促使細(xì)胞和組織更好地生長(zhǎng)。然而,,隨著技術(shù)的進(jìn)步,,其功能和運(yùn)作都變得越來越精確、可靠和方便,。如今,,二氧化碳培養(yǎng)箱已成為實(shí)驗(yàn)室普遍使用的常規(guī)儀器之一,已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué),、免疫學(xué),、遺傳學(xué)、微生物,、農(nóng)業(yè)科學(xué),、藥物學(xué)的研究和生產(chǎn)。
CO2培養(yǎng)箱是通過對(duì)周圍環(huán)境條件的控制制造出一個(gè)能使細(xì)胞/組織更好地生長(zhǎng)的環(huán)境,,條件控制的結(jié)果就會(huì)形成一個(gè)穩(wěn)定的條件:如恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4),、穩(wěn)定的溫度(37°C)、較高的相對(duì)濕度(95%),、穩(wěn)定的CO2水平(5%),,這就是為什么上述領(lǐng)域的研究員如此熱衷于使用方便穩(wěn)定可靠的二氧化碳培養(yǎng)箱。
此外,,由于增加了二氧化碳濃度控制,,并且使用微控制器對(duì)培養(yǎng)箱溫度進(jìn)行精確控制,使生物細(xì)胞,,組織等的培養(yǎng)成功率,、效率都得到改善??傊?,二氧化碳培養(yǎng)箱是普通電熱恒溫培養(yǎng)箱不可替代的新型培養(yǎng)箱。
二氧化碳培養(yǎng)箱是眾多動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)儀器,通過精確控制提供穩(wěn)定的環(huán)境因素從而給細(xì)胞提供適宜且穩(wěn)定的生長(zhǎng)條件,,例如恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4),、穩(wěn)定的溫度(37°C)、較高的相對(duì)濕度(95%),、穩(wěn)定的二氧化碳水平(5%),,使得實(shí)驗(yàn)過程便利穩(wěn)定且可靠。如今,,因其優(yōu)質(zhì)性能和帶來的便利性,,二氧化碳培養(yǎng)箱已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué),、免疫學(xué),、遺傳學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)等領(lǐng)域的研究與生產(chǎn),。
上海簡(jiǎn)戶儀器設(shè)備有限公司是一家高科技合資企業(yè),生產(chǎn)銷售鹽霧箱,、恒溫恒濕機(jī)、冷熱沖擊機(jī),、振動(dòng)試驗(yàn)機(jī),、機(jī)械沖擊機(jī)、跌落試驗(yàn)機(jī)的環(huán)境試驗(yàn)儀器的公司,,研發(fā)生產(chǎn)銷售經(jīng)營(yíng)各類可靠性環(huán)境試驗(yàn)設(shè)備,。經(jīng)驗(yàn)豐富,并得到許多國(guó)內(nèi)外廠商的信賴與支持,。
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