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技術(shù)文章

電泳儀使用方法及注意事項

閱讀:2703          發(fā)布時間:2016-8-31

1.電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,,禁止人體接觸電極,、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,,如需要應(yīng)先斷電,,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,,以防漏電,。
2.儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞,。
3.由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,,電泳時所通過的電流量也不同,其泳動速度及泳至終點所需時間也不同,,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進(jìn)行,。
4.在總電流不超過儀器額定電流時(zui大電流范圍),,可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,,否則容易影響儀器壽命,。
5.某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時,允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī),,但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī),,否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為機(jī)器損壞,。
6.使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音,、放電或異常氣味,,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,,以免發(fā)生意外事故,。
研發(fā)背景
1937年,瑞典生化學(xué)家Tiselius集前人百余年探索電泳現(xiàn)象之大成,,發(fā)明了Tiselius電泳儀,,在此基礎(chǔ)上建立了研究蛋白質(zhì)的自由界面電泳方法,利用該法證明人血清是由白蛋白(A),、Α,、β、γ球蛋白組成,,并因此于1948年獲得阿果獎,。隨后電泳技術(shù)的發(fā)展突飛猛進(jìn),1949年,,RicketlsMarrack等人證明人血清蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離可依次分為白蛋白,,Α1、α2,、β,、γ球蛋白五個組分,1957年Reiner對人血清五個組分蛋白進(jìn)行了定量分析,。
但自由界面電泳沒有固定支持介質(zhì),,擴(kuò)散和對流作用較強(qiáng),影響分離效果,,于是在50年代相繼出現(xiàn)了固相支持介質(zhì)電泳,。zui初的支持介質(zhì)是濾紙和醋酸纖維素膜,目前這些介質(zhì)在實驗室已經(jīng)應(yīng)用較少。在很長一段時間里,,小分子物質(zhì)如氨基酸,、多肽、糖等通常用濾紙,、纖維素或硅膠薄層平板作為介質(zhì)進(jìn)行電泳分離,、分析,但目前一般使用靈敏度更高的技術(shù)如液相色譜法(HPLC)等來進(jìn)行分析,。而對于復(fù)雜的生物大分子,,以濾紙、硅膠或醋酸纖維素膜等作為支持介質(zhì)進(jìn)行電泳,,其分離效果并不理想,。于是1959年,Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein先后利用人工合成凝膠作支持介質(zhì)建立了聚丙烯酰胺凝膠電泳,,從而大大提高了電泳的分辨率和分離效果,,增強(qiáng)了電泳技術(shù)的發(fā)展、滲透及與其他技術(shù)結(jié)合配套的能力,。致使各式各樣的電泳技術(shù)和電泳材料如雨后春筍,、競相爭榮,成為當(dāng)代實驗科學(xué)技術(shù)中品種繁多,、應(yīng)用廣泛,、基礎(chǔ)與技術(shù)皆備的大技術(shù)。

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