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應(yīng)如何正確使用熒光分光光度計來進行測試呢,?

時間:2015/12/17閱讀:2685
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應(yīng)如何正確使用熒光分光光度計來進行測試呢,?以下將由上海旦鼎技術(shù)人員為您詳述:

熒光分光光度計詳細測試步驟

(一)樣品準備

1.液體樣品根據(jù)用戶提供的技術(shù)指標,檢查濃度范圍是否合適,,如果需要稀釋,,則要考慮所需溶劑類型和稀釋倍數(shù)。

2.固體樣品均勻粉末,、片狀或具有光滑平面的塊狀樣品,,均可直接測定。

(二)操作步驟

1.開機:接通電源,,打開主機開關(guān),,點燃(打開)光源后,根據(jù)說明書要求啟動計算機,。

2.檢測前準備:參照儀器說明書,,在20天內(nèi)至少進行一次激發(fā)校準和發(fā)射校準,,檢測前儀器應(yīng)預(yù)熱。

3.工作條件的選擇:環(huán)境溫度應(yīng)在20℃±5℃;相對濕度不大于70%;電源穩(wěn)定,,無磁場,、電場干擾。根據(jù)樣品的特性及熒光強度,,選擇合適的儀器工作條件(如狹縫,、PM增益、響應(yīng)時間等),。

4.基本測定

(1)熒光激發(fā)光譜測定

設(shè)置儀器參數(shù),,掃描發(fā)射波長,找到maxλem,,以此為發(fā)射波長,,記錄發(fā)射強度作為激發(fā)波長的函數(shù),,便得到激發(fā)光譜,。

(2)熒光發(fā)射光譜測定

設(shè)置儀器參數(shù),掃描激發(fā)波長,,找到maxλex,,以此為激發(fā)波長,記錄發(fā)射強度與發(fā)射波長間的函數(shù)關(guān)系,,便得到熒光發(fā)射光譜,。

(3)差譜測定

設(shè)置儀器參數(shù),選擇合適的工作方式,,測定背景溶液的發(fā)射光譜并儲存起來,,在一定的工作方式下,掃描樣品溶液的發(fā)射波長,,得到當時的光度值和儲存的背景值之間的差示值,,即差譜。

(4)峰面積積分

選擇適當?shù)墓ぷ鞣绞?,對樣品溶液進行積分操作,,即得到峰面積積分。

(5)熒光強度

選擇合適的測量參數(shù),,設(shè)置λex,、λem,采用定點讀數(shù)或掃描方式,,即可測得所選波長處的熒光強度,。

(6)定量測定

配制一系列已知濃度的標準溶液,在一定的測定條件下,,設(shè)置λex,、λem,,按照由稀至濃的次序,測定標準溶液的熒光強度,,繪制熒光強度—濃度的工作曲線,,不改變儀器參數(shù)測定未知溶液的熒光強度,,由工作曲線即可求出未知溶液的濃度。

(三)分析結(jié)果的表述

1.熒光激發(fā)光譜,、發(fā)射光譜以及其他光譜由儀器控制電腦直接繪出。

2.峰面積積分,、熒光強度由儀器控制電腦計算顯示,。

3.定量測試:在相同的測定條件下,測定一系列已知濃度的標準溶液的熒光強度,,繪制出熒光強度-濃度的工作曲線,。濃度未知的溶液的熒光強度測定后,由工作曲線求出該溶液的濃度,。

 

熒光分光光度計 

熒光分光光度計使用注意事項

1.在實驗開始前,,應(yīng)提前打開儀器預(yù)熱,并配制好所需的溶液,,對于已經(jīng)配制好的溶液,,在不用時放在4℃冰箱中保存,放置時間*過一星期的溶液要重新配制,。

2.實驗所用的樣品池是四面透光的石英池,,拿取的時候用手指掐住池體的上角部,不能接觸到四個面,,清洗樣品池后應(yīng)用擦鏡紙對其四個面進行輕輕擦拭,。

3.在測試樣品時,注意熒光強度范圍的設(shè)定不要太高,,以免測得的熒光強度*過儀器的測定上限,。

4.實驗結(jié)束后,要及時的清理臺面,,處理廢液,,清洗和放置好樣品池,將下次要用的溶液放回冰箱,,并且按規(guī)定登記實驗記錄,,養(yǎng)成良好的實驗習慣。

通過以上介紹對于熒光分光光度計的測試步驟及使用注意事項,,您是否了解了呢,?如有不明之處,,歡迎隨時與我們!

      《熒光分光光度計詳細測試步驟》由上海旦鼎為您提供,,歡迎轉(zhuǎn)截,,轉(zhuǎn)截請注明來源!

     

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