對(duì)于分光光度計(jì)我們應(yīng)用比較廣泛,，但是了解甚少,，在此為大家介紹一下分光光度計(jì)的有關(guān)知識(shí)，希望能夠更好的了解以及應(yīng)用,。

分光光度計(jì)原理：是利用分光光度法通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,。

分光光度計(jì)主要組成由光源、單色器,、樣品室,、檢測(cè)器、信號(hào)處理器和顯示與存儲(chǔ)系統(tǒng)組成,。

1.分光光度計(jì)按照波長(zhǎng)及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為：可見光分光光度計(jì),，紫外分光光度計(jì)，紅外分光光度計(jì),，熒光分光光度計(jì),，原子吸收分光光度計(jì)。

可見光分光光度計(jì)測(cè)定波長(zhǎng)范圍為400760 nm的可見光區(qū)
紫外分光光度計(jì)測(cè)定波長(zhǎng)范圍為200400nm的紫外光區(qū)
紅外分光光度計(jì)測(cè)定波長(zhǎng)范圍為大于760nm的紅外光區(qū)
熒光分光光度計(jì)用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜
原子吸收分光光度計(jì)光源發(fā)出被測(cè)的特征光譜輻射被經(jīng)過原子化器后的樣品蒸氣中的待測(cè)元素基態(tài)原子所吸收通過測(cè)定特征輻射被吸收的大小來求出被測(cè)元素的含量,。

不同種類的分光光度計(jì)的基本原理相似都是利用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源通過系列分光裝置從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,。光源透過測(cè)試的樣品后部分光源被吸收通過測(cè)量樣品的吸光值經(jīng)過計(jì)算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度,。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。 

2.分光光度計(jì)按自動(dòng)化程度分類可分:為手動(dòng),、半自動(dòng),、自動(dòng)分光光度計(jì)。 

3.分光光度計(jì)按軟件可分為:帶掃描,、不帶掃描,。

分光光度計(jì)較為常使用的就是紫外可見分光光度計(jì)。

根據(jù)紫外可見分光光度計(jì)的儀器結(jié)構(gòu)可以分為三類：?jiǎn)喂馐止夤舛扔?jì),、雙光束分光光度計(jì)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì),。

1、單光束分光光度計(jì)

單光束是指從光源今發(fā)出的光,，經(jīng)過單色器等—系列光學(xué)元件,，通過吸收池，較為后照在檢測(cè)器上時(shí),，始終為一束光,。它只官一束單色光(光束只能交替通過參比溶液、樣品溶液),，一只比色皿,，一只光電轉(zhuǎn)換器。工作時(shí),，一條光路,，先通過多比溶液，再通過試樣溶液進(jìn)行光強(qiáng)度的測(cè)旦,?！　?/span>

單光束分光光度計(jì)的特點(diǎn)是結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、價(jià)格低,，主要適用于做定量分析,，測(cè)量結(jié)果受電源的波動(dòng)影響較大，容易給測(cè)量結(jié)果帶來較大的誤差,。所以,，它們?cè)谖蛔粕鲜艿较拗啤Ｒ话銇碇v,，要求較高的制藥行業(yè),、質(zhì)量檢驗(yàn)行加等不適宜使用單光束紫外可見分光光度訃。

2,、雙光束分光光度計(jì)

雙光束分光光度汁就是有兩束單色光的紫外可見分光光度計(jì),。其光路設(shè)計(jì)基本上與單光束分光光度計(jì)相似。區(qū)別是在單色器與吸收弛之間加了一個(gè)切光器，其作用是以一定的頻率把一個(gè)光束交替分為強(qiáng)度相等的兩柬光,，使一路通過參比溶液,，另一路通過樣品溶液。然后由檢測(cè)器交替接收參比信號(hào)和樣品信號(hào),。接收的光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)后,，由前置放大器放大，并進(jìn)一步解調(diào),、放大、補(bǔ)償?shù)?，較為后由顯示系統(tǒng)顯示,。

3.雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)采用兩個(gè)單色器，可以同時(shí)得到兩柬波長(zhǎng)不同的單色光,，其光路. 光源發(fā)出的光被兩個(gè)單色器分別分離出波長(zhǎng)為4：和4z的單色光,，通過切光器，將兩束光以一定的時(shí)間間隔交替照射到裝有樣品試液的同一個(gè)吸收池,，由檢測(cè)器顯示出試液在波長(zhǎng)4?和42的透射比或吸光度,。雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)不僅能測(cè)量高濃度試樣、多組分混合試樣,，而義測(cè)定混濁樣品時(shí)比單波長(zhǎng)測(cè)定更靈敏,、更有選擇性。雙波長(zhǎng)測(cè)定時(shí),，兩個(gè)波長(zhǎng)的光通過同一吸收池,，pJ以消除因吸收他的參數(shù)不同、位置不同,、污垢以及制備參比溶液等帶來的誤差,，從而可以顯著地提高測(cè)定的準(zhǔn)確度。

單光束分光光度計(jì)：由一束經(jīng)過單色器的光,，輪流通過參比溶液和樣品溶液,，以進(jìn)行光強(qiáng)度測(cè)量，主要適于做定量分析,。

雙光束分光光度計(jì)：以兩束光一束通過樣品,、另一束通過參考溶液的方式來分析樣品的分光光度計(jì)。這種方式可以克服光源不穩(wěn)定性,、某些雜質(zhì)干擾因素等影響,，還可以檢測(cè)樣品隨時(shí)間的變化等。 

雙光束分光光度計(jì)操作規(guī)程

1.接通電源,，打開雙光束分光光度計(jì)開關(guān),，掀開樣品室暗箱蓋，預(yù)熱10分鐘。

2.將靈敏度開關(guān)調(diào)至“1”檔（若零點(diǎn)調(diào)節(jié)器調(diào)不到“0”時(shí),，需選用較,。）

3.根據(jù)所需波長(zhǎng)轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)選擇鈕。

4.將空白液及測(cè)定液分別倒入比色杯3/4處,，用擦鏡紙擦清外壁,，放入樣品室內(nèi)，使空白管對(duì)準(zhǔn)光路,。

5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點(diǎn)調(diào)節(jié)器,，使讀數(shù)盤指針指向t=0處。

6.蓋上暗箱蓋,，調(diào)節(jié)“100”調(diào)節(jié)器,，使空白管的t=100，指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿,，分別讀出測(cè)定管的光密度值,，并記錄。

7.比色完畢,，關(guān)上電源,，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈,。

【應(yīng)用范圍】

可廣泛應(yīng)用于生命科學(xué),、化工、制藥,、質(zhì)量檢驗(yàn),、環(huán)境保護(hù)等方面

【注意事項(xiàng)】

為了防止光電管疲勞，不測(cè)定時(shí)必須將試樣室蓋打開,，使光路切斷,，以延長(zhǎng)光電管的使用壽命。

取拿比色皿時(shí),，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,，而不能碰比色皿的光學(xué)表面。

比色皿不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗滌,，也不能用毛刷清洗,。

比色皿外壁附著的水或溶液應(yīng)用擦鏡紙或細(xì)而軟的吸水紙吸干，不要擦拭,，以免損傷它的光學(xué)表面,。

分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器，應(yīng)用也是比較廣泛,。在此這里介紹的分光光度計(jì)的知識(shí)是由上海旦鼎貿(mào)易有限公司整理編輯,，如有需要轉(zhuǎn)載敬請(qǐng)說明,，謝謝！