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當(dāng)前位置:上海旦鼎國際貿(mào)易有限公司>>技術(shù)文章>>老手酶標(biāo)儀的使用注意事項
1、工作環(huán)境
酶標(biāo)儀是一種精密的光學(xué)儀器,,因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,,還能夠延長其使用壽命。根據(jù)DIN VDE 0871條例,,儀器應(yīng)放置在無磁場和干擾電壓的位置,。依據(jù)DIN 45 635 -19條例:
儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下。
為延緩光學(xué)部件的老化,,應(yīng)避免陽光直射,。
操作時環(huán)境溫度應(yīng)在15℃-40℃之間,環(huán)境濕度在15%-85%之間,。
操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定,。
操作環(huán)境空氣清潔,避免水汽,,煙塵,。
保持干燥、干凈,、水平的工作臺面,,以及足夠的操作空間。
2,、操作注意事項
酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果,,因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果,試劑盒的使用必須規(guī)范,。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測判斷結(jié)果,,操作過程隨意性較大,在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時糾正操作習(xí)慣,,會造成較大誤差,。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項:
使用加液器加液,加液頭不能混用,。
洗板要洗干凈,。如果條件允許,使用洗板機(jī)洗板,避免交叉污染,。
嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,,反應(yīng)時間準(zhǔn)確。
在測量過程中,,請勿碰酶標(biāo)板,,以防酶標(biāo)板傳送時擠傷操作人員的手。
請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,,操作完成后請洗手,。
如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害,,請嚴(yán)格按照試
劑盒的操作說明,,以防對操作人員造成損害。
如果儀器接觸過污染性或傳染性物品,,請進(jìn)行清洗和消毒,。
不要在測量過程中關(guān)閉電源。
對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差,,應(yīng)根據(jù)實際情況及時修改參數(shù),,以達(dá)到最佳效果。
使用后蓋好防塵罩,。
出現(xiàn)技術(shù)故障時應(yīng)及時與廠家聯(lián)系,,切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀。
酶標(biāo)儀及洗板機(jī)選購指南
酶標(biāo)儀(Microplate Reader)是對酶聯(lián)免疫檢測( EIA)實驗結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器,。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測抗體或抗原的濃度,。
酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗、生物學(xué)研究,、農(nóng)業(yè)科學(xué),、食品和環(huán)境科學(xué)中,特別在近幾年中,,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應(yīng)用,,使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣泛,同時促進(jìn)了生殖健康技術(shù)水平提高 ,。
目前國內(nèi)許多計生站系統(tǒng)開展了酶免檢測項目,,如:乙肝五項、愛滋病檢測,、優(yōu)生優(yōu) 育系列檢測,、激素檢測等。過去多數(shù)采用目測方法,報出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù),。例如:某弓形蟲檢測試劑盒中,,臨界值規(guī)定為:陰性對照品的 OD 值×2.5,通過目測無法判斷標(biāo)本孔的反應(yīng)顏色是否超過臨界值,。肉眼進(jìn)行兩孔之間的顏色比較可能還行,,但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。
要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀,,酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀,,并提供酶標(biāo)儀測定的原始數(shù)據(jù),而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的,。同時酶免檢測的 項目往往是一些實質(zhì)性的感染和病變(如:肝炎,、愛滋病、優(yōu)生優(yōu)育等),,判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn),,由誤診引起的糾紛很難處理。另外,,住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝,、愛滋等 EIA 試劑檢測是避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所采用,。
我國免疫診斷方法主要有如下三種:酶免(EIA),、放免(RIA)和發(fā)光,在市場上的情況如下:
方法 所處市場周期
放免 衰退期
酶免 成長期
發(fā)光 進(jìn)入期
放免技術(shù)由于試劑的污染和有效期等問題在國際和國內(nèi)市場逐漸被淘汰,,而化學(xué)發(fā)光試劑和設(shè)備比較昂貴,,使得其在國內(nèi)的普及特別在計生系統(tǒng)普及需要較長時間,EIA 技術(shù)穩(wěn)定,,試劑價格合理,,供應(yīng)充,酶免技術(shù)在中國市場處于成長期,,因此購買酶標(biāo)儀正合適宜,。
尤其要提到的是,在中國的計劃生育和婦幼保健系統(tǒng)配備酶標(biāo)儀已經(jīng)迫在眉睫,。早在幾年以前, 世界衛(wèi)生組織已建議對孕婦進(jìn)行 TORCH五項常規(guī)篩查,,但是遺憾的是由于缺乏酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等設(shè)備,RCH的檢測在中國還未能普遍開展,。TORCH 感染在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)中稱為TORCH綜合癥,,由于孕婦, 胎兒和新生兒都易被感染, 它已受到婦產(chǎn)科和兒科的極大重視。妊娠期感染不僅危害母體,,往往還可對胎兒和新生兒產(chǎn)生嚴(yán)重影響,。通過胎盤可引起子宮內(nèi)感染而導(dǎo)致流產(chǎn),、早產(chǎn)、死胎或胎兒生長遲緩和畸形,,通過產(chǎn)道和母乳可引起新生兒感染,。如累及神經(jīng)系統(tǒng)可造成不同程度的智力障礙以及各種癱瘓、失聰,、失明等嚴(yán)重后遺癥,,影響人口素質(zhì),因而 TORCH 感染與優(yōu)生優(yōu)育有極為重要的關(guān)系,。因此,,RCH(IgG和gM)檢查通常也稱為優(yōu)生優(yōu)育十項檢查。目前,,TORCH的檢測方法主要有放免(RIA)和酶免(EIA),。由于放免方法需要特殊儀器,且有放射危害,,目前正被酶免(EIA)方法取代,。EIA方法具有特異性強(qiáng),靈敏度高,,簡單快速,,成本低等優(yōu)點,只要配備有酶標(biāo)儀和其他相應(yīng)的設(shè)備 ,,多數(shù)普通實驗室均可方便地開展 ,。 很顯然, 盡快在計生系統(tǒng)普及酶標(biāo)儀等設(shè)備是一個迫切的需求。
這項工作的落實將有助于提高診治水平,,降低母嬰發(fā)病率,,從而提高整個國民的健康素質(zhì)。目前市場上提供的EIA試劑越來越多,,如:T3,、T4、TSH,、TORCH 系列、不孕系列,、各種癌癥標(biāo)志物,、傷寒、副傷寒等,,另外通過母嬰傳播的性傳播疾病(如淋病,、梅毒、HIV)和肝炎(如HBV,、HCV),,以及胎兒的抗體,,新生兒TSH的測定,疫苗反應(yīng)等,,市場上也都有成套 EIA 試劑盒供應(yīng),。使用酶標(biāo)儀有利于拓展檢測項目,提高檢測水平,,其社會效益和 經(jīng)濟(jì)效益并舉,。
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