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注意事項
1. 電泳儀通電進入工作狀態(tài)后,,禁止人體接觸電極,、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內取放東西,,如需要應先斷電,,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,,以防漏電,。
2. 儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導線插頭,,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,,雖然儀器內部附設有保險絲,,但短路現(xiàn)象仍有可能導致儀器損壞。
3. 由于不同介質支持物的電阻值不同,,電泳時所通過的電流量也不同,,其泳動速度及泳至終點所需時間也不同,故不同介質支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行,。
4. 在總電流不超過儀器額定電流時(*大電流范圍),,可以多槽關聯(lián)使用,但要注意不能超載,,否則容易影響儀器壽命,。
5. 某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時,允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機,,但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負載再開機,,否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為機器損壞,。
6. 使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音,、放電或異常氣味,,須立即切斷電源,進行檢修,,以免發(fā)生意外事故,。
夾芯式垂直電泳槽使用方法:
一、組成部件
(一)裝有鉑金絲的貯液槽一對,,配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口,。
(二)凹型橡膠框,配有玻璃板,,可分別制作厚度為lmm,、1.5mm的凝膠板,操作時根據(jù)需要選擇適當厚度的玻璃板及梳子配套使用,。
(三)樣品孔模具(梳子)用于電泳加樣,。
(四)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對,28D,、30型為5對,。
(五)橡膠管五根。兩根長的用于連接冷卻水的出入口,;中等長度的兩根用于連接電極緩,;中液的流出口;*短的一根用于連接貯液槽間的冷卻水,。
(六)導線1付,。
● 二,、使用方法
(一)清洗部件
上述部件組裝前要底清洗干凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框,,必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑底清洗干凈,。清洗后的玻璃板應放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。
(二)組裝電泳槽
A,、1、將四只固定螺桿插到一只貯液框(半上槽)的相應孔洞中,,然后將貯液框仰放在桌上,。
2、左手拿凹型槽橡膠???,右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側邊緣插到橡膠模框內 (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板),。
3,、將帶有玻璃的橡膠模框子放在仰放的貯液槽框架上,,其下緣必須對齊貯液槽框下緣,。
4、雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合,,并使橡膠框上的凸出線位于貯液槽有機玻璃框中央,。
5、裝上四只螺母,,擰緊螺絲,。注意擰緊螺絲時用力應均勻,*好用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊,。
6,、將電泳槽垂直豎起,放在桌上,,帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰端),,帶長玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽端),在長玻璃板與橡膠框間有一縫隙,。此縫隙可用已熔化的10%瓊脂沿長玻璃板下端灌入,,為防止留存氣泡,可稍抬起一端即可趕去氣泡,。待瓊脂全凝固后才能灌膠,。
B、也可將槽垂直豎起,,將帶有玻璃的橡膠??蛑苯臃湃氩壑?,對稱擰緊螺絲后,用瓊脂封底邊,。
(三)灌膠
1,、先灌分離膠,待凝固后再灌濃縮膠,。灌膠前接通冷卻水,,夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。
2,、用細頭滴管吸取膠液,,沿長、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液,。為防止產(chǎn)生氣泡,,可稍拾起另一端(氣泡往高處走),不斷加入膠液,。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處,,輕輕加少許水,雙手輕輕將梳子插入,,待膠凝后就可形成凹形加樣孔,。
3、為防止漏膠,,在上,、下貯液槽中立即加入蒸餾水,但蒸餾水不能超過短玻璃板上緣,。
4,、膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折
射率不同的亮區(qū)。
(四)加樣
1,、松開連接上,、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子,放掉槽內的蒸餾水,,待水流完后,,再夾緊夾子。
2,、雙手輕輕取出樣品梳子,,即可看到界線清楚的加樣孔,將孔中水分吸去(注意千萬不要碰壞孔沿的字面),。
3,、在上、下貯液槽中加入緩;中液,,液體高度應超過上貯液槽短玻璃板上緣,。
4、用微量注射器吸取一定量的樣品加到長,、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(注意加樣動作要輕,,針頭不能碰壞膠面)。
(五)電泳
一貯液槽導線與電泳儀的負極相連,,下貯液槽導線與電泳儀的正極相連,。檢查線路無誤,方可按照所要求的電壓電流進行電泳,。
(六)取出膠板
電泳結束,,旋松螺母,取出膠框,,剝出玻璃板,,在兩塊玻璃板下角空隙內,,用刀片背面輕輕撬動,,即可將膠面與一塊玻璃板分開,將有膠板的玻璃板平放在桌上,,雙手輕輕沿凝膠底將膠片托起,,放在大培養(yǎng)皿中染色,膠板經(jīng)漂洗,、脫色后即可看到清晰的分離條帶,。
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