光是電磁波,，波長100nm～400nm稱為紫外光,， 400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大子780nm稱為紅外光,。人們只所以能夠看到色彩,，是因?yàn)楣庹丈涞轿矬w上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,，是因?yàn)橹参镂樟斯庵械募t色光譜,。酶標(biāo)儀測(cè)定的原理是在特定波長下，檢測(cè)被測(cè)物的吸光值,。
　　檢測(cè)單位：
　　光通過被檢測(cè)物,，前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量，特定波長下,，同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系,。
　　檢測(cè)單位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的縮寫,，表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度,， OD＝1og（1／trans），其中trans為檢測(cè)物的透光值,。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：
E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 為在檢測(cè)物之前的光強(qiáng)度，Ι為從被檢測(cè)物出來的光強(qiáng)度,。
　　OD值由下述公式計(jì)算：
　　E＝OD=C×D×E
　　C為檢測(cè)物的濃度
　　D為檢測(cè)物的厚度
　　E為摩爾因子
　　在特定波長下測(cè)定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量,。如果選擇其它的波長段,，就會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,，在測(cè)定檢測(cè)物時(shí),，我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測(cè)，稱為測(cè)量波長,。
　　但是每一種物質(zhì)對(duì)光能量還存在一定的非特異性吸收,，為了消除這種非特異性吸收，我們?cè)龠x取一個(gè)參照波長,，以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性,。在參照波長下，檢測(cè)物光的吸收最小,。檢測(cè)波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收,。
　　Anthos 酶標(biāo)儀檢測(cè)值計(jì)算
　　儀器中的檢測(cè)器接收透過被檢測(cè)物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號(hào),，最大為4095,。儀器定義沒有光源下的透光值為 0％，沒有檢測(cè)物的透光值為100％,。則實(shí)際檢測(cè)中,，檢測(cè)物的透光值均在 0％一100％之間。透光值
的計(jì)算如下：
　　T＝（Meas—Min）／（Max—Min）
　　其中T為透光值,， Meas為檢測(cè)的二進(jìn)位數(shù)值,， Min為在 0％的情況下檢測(cè)的二進(jìn)位數(shù)值， Max為在100％的情況下檢測(cè)的二進(jìn)位數(shù)值,，舉例如下：
　　MaX=3600 Mn=20 Meas＝30
　　T=（30-20）/3600-20)＝0．0028
　　OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552
　　Anthos 酶標(biāo)儀的中心定位
　　儀器會(huì)自動(dòng)對(duì)酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位,，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測(cè)的不準(zhǔn)確。在對(duì)每一個(gè)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí),，儀器其實(shí)要進(jìn)行35個(gè)點(diǎn)的測(cè)量，選取最中間的5個(gè)點(diǎn)的均值為本孔的OD值,。
　　光源的參照通道
　　參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響,。
　　酶標(biāo)儀的用途和其它提示
　　用于ELISA試劑的測(cè)定，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室,，包括臨床實(shí)驗(yàn)室,。
　　質(zhì)量控制
　　質(zhì)量控制是試劑檢測(cè)的重要因素。請(qǐng)按照試劑說明書的要求進(jìn)行質(zhì)量控制。
　　空白校正
　　有一些試劑盒的說陰書將空白孔設(shè)置為空氣,，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的,，請(qǐng)按照試劑盒的說明書要求進(jìn)行。
　　檢測(cè)結(jié)果的解釋
　　由于有相當(dāng)多的因素會(huì)影響檢測(cè)的結(jié)果,，如不同的酶標(biāo)板,，檢測(cè)試劑的體積，都會(huì)造成OD值的不,，因此,，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測(cè)結(jié)果才能比較和分析。對(duì)結(jié)果的臨床解釋請(qǐng)依照試劑盒的說明書進(jìn)行,。
酶標(biāo)儀的使用注意事項(xiàng)
1,、工作環(huán)境
　　酶標(biāo)儀是一種精密的光學(xué)儀器，因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,，還能夠延長其使用壽命,。根據(jù)DIN VDE 0871條例，儀器應(yīng)放置在無磁場(chǎng)和干擾電壓的位置,。依據(jù)DIN 45 635 －19條例：
　　儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下,。
　　為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽光直射,。
　　操作時(shí)環(huán)境溫度應(yīng)在15℃－40℃之間,，環(huán)境濕度在15％－85％之間。
　　操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定,。
　　操作環(huán)境空氣清潔,，避免水汽，煙塵,。
　　保持干燥,、干凈、水平的工作臺(tái)面,，以及足夠的操作空間,。
2、操作注意事項(xiàng)
　　酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果,，因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果,，試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測(cè)判斷結(jié)果,，操作過程隨意性較大,，在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時(shí)糾正操作習(xí)慣，會(huì)造成較大誤差,。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項(xiàng)：
　　使用加液器加液,，加液頭不能混用,。
　　洗板要洗干凈。如果條件允許,，使用洗板機(jī)洗板,，避免交叉污染。
　　嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,，反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確,。
　　在測(cè)量過程中，請(qǐng)勿碰酶標(biāo)板,，以防酶標(biāo)板傳送時(shí)擠傷操作人員的手,。
　　請(qǐng)勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成后請(qǐng)洗手,。
　　如果使用的樣品或試劑具有污染性,、毒性和生物學(xué)危害，請(qǐng)嚴(yán)格按照試
　　劑盒的操作說明,，以防對(duì)操作人員造成損害,。
　　如果儀器接觸過污染性或傳染性物品，請(qǐng)進(jìn)行清洗和消毒,。
　　不要在測(cè)量過程中關(guān)閉電源,。
　　對(duì)于因試劑盒問題造成的測(cè)量結(jié)果的偏差，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參數(shù),，以達(dá)到最佳效果,。
　　使用后蓋好防塵罩。