液相色譜儀主要有進樣系統(tǒng),、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng),、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),，下面將分別敘述其各自的組成與特點。液相色譜儀工作原理,。
1．進樣系統(tǒng)
一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作,，進樣量是恒定的,。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
2．輸液系統(tǒng)
該系統(tǒng)包括高壓泵,、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l．47～4．4X107Pa,，流速可調(diào)且穩(wěn)定,，當(dāng)高壓流動相通過層析柱時,，可降低樣品在柱中的擴散效應(yīng),，可加快其在柱中的移動速度,，這對提高分辨率,、回收樣品,、保持樣品的生物活性等都是有利的,。流動相貯存錯和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變,，包括改變洗脫液的極性、離子強度,、PH值，或改用競爭性抑制劑或變性劑等,。這就可使各種物質(zhì)（即使僅有一個基團的差別或是同分異構(gòu)體）都能獲得有效分離。
3.分離系統(tǒng)
該系統(tǒng)包括色譜柱,、連接管和恒溫器等,。色譜柱一般長度為10～50cm（需要兩根連用時，可在二者之間加一連接管）,，內(nèi)徑為2～5mm,，由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成，住內(nèi)裝有直徑為5～10μm粒度的固定相（由基質(zhì)和固定液構(gòu)成）．固定相中的基質(zhì)是由機械強度高的樹脂或硅膠構(gòu)成,，它們都有惰性（如硅膠表面的硅酸基因基本已除去）,、多孔性（孔徑可達1000?）和比表面積大的特點，加之其表面經(jīng)過機械涂漬（與氣相色譜中固定相的制備一樣）,，或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因（如磷酸基,、季胺基、羥甲基,、苯基,、氨基或各種長度碳鏈的烷基等）或配體的有機化合物。因此,，這類固定相對結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性,。例如，在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素（PSA）后,，就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來。
另外,，固定相基質(zhì)粒小，柱床極易達到均勻,、致密狀態(tài),，極易降低渦流擴散效應(yīng),。基質(zhì)粒度小，微孔淺,，樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短,。這些對縮小譜帶寬度,、提高分辨率是有益的,。根據(jù)柱效理論分析，基質(zhì)粒度小,，塔板理論數(shù)N就越大。這也進一步證明基質(zhì)粒度小,，會提高分辨率的道理,。
再者，液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調(diào)到60C,，通過改善傳質(zhì)速度,，縮短分析時間，就可增加層析柱的效率,。
4．檢測系統(tǒng)
液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器,、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。
（1）紫外檢測器
該檢測器適用于對紫外光（或可見光）有吸收性能樣品的檢測,。其特點：使用面廣（如蛋白質(zhì),、核酸、氨基酸,、核苷酸,、多肽、激素等均可使用）,；靈敏度高（檢測下限為10-10g／ml）,；線性范圍寬；對溫度和流速變化不敏感,；可檢測梯度溶液洗脫的樣品,。
（2）示差折光檢測器
凡具有與流動相折光率不同的樣品組分，均可使用示差折光檢測器檢測,。目前,，糖類化合物的檢測大多使用此檢測系統(tǒng)。這一系統(tǒng)通用性強,、操作簡單,，但靈敏度低（檢測下限為10-7g／ml），流動相的變化會引起折光率的變化,，因此,，它既不適用于痕量分析,，也不適用于梯度洗脫樣品的檢測。
（3）熒光檢測器
凡具有熒光的物質(zhì),，在一定條件下,，其發(fā)射光的熒光強度與物質(zhì)的濃度成正比。因此,，這一檢測器只適用于具有熒光的有機化合物（如多環(huán)芳烴,、氨基酸、胺類,、維生素和某些蛋白質(zhì)等）的測定,，其靈敏度很高（檢測下限為10-12～10-14g／ml），痕量分析和梯度洗脫作品的檢測均可采用,。
5.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)
該系統(tǒng)可對測試數(shù)據(jù)進行采集,、貯存、顯示,、打印和處理等操作,，使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開展,。
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