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ABI Veriti PCR儀售后維修與使用操作步驟:
ABI Veriti PCR儀操作步驟
1,、打開PCR儀的熱蓋,插入0.2ml的樣品管。蓋好熱蓋。
2,、打開PCR儀的電源,儀器程序開始初始化,,需等待幾分鐘,。
3,、初始化完成后,顯示主菜單:
4,、點(diǎn)“Browse/New Methods",,進(jìn)入PCR程序列表:
5、可以直接點(diǎn)一個PCR程序,,選擇“Start Run"運(yùn)行,;點(diǎn)右邊的符號,可以選 擇不同的文件夾,。如要新建一個PCR程序,,點(diǎn)“New",出現(xiàn)PCR程序:
6,、添加一段程序:點(diǎn)中上方的“Stage"位置,該位置變紅,;再點(diǎn)“Add",,軟件將加入一段新的程序。
7,、修改循環(huán)數(shù),、溫度、時間:點(diǎn)中循環(huán)次數(shù),、溫度或時間位置,,下方出現(xiàn)數(shù)字鍵。依次點(diǎn)數(shù)字鍵,,出現(xiàn)合適數(shù)字后,,點(diǎn)“Done"確定。
8,、增加一個步驟:點(diǎn)“Step"位置,,該位置變紅;再點(diǎn)“Add",,軟件將加入一個新的步驟,。
9、刪除一個步驟:點(diǎn)“Step"位置,,在點(diǎn)“Delete",,軟件將該步驟刪除。
10,、建立梯度模式:
1)點(diǎn)中一個步驟,,再點(diǎn)“Option"鍵,出現(xiàn)選項如下
2)點(diǎn)“VeriFlex step",,出現(xiàn)梯度創(chuàng)建窗口:
輸入6個梯度溫度,,溫度下方的“1-2"是指對應(yīng)的1,、2兩行加熱孔,全部輸好后,,點(diǎn)“Done"確定,。注意:相鄰的兩個梯度溫度之差不能超過5℃!
11,、建立漸變模式:
1)點(diǎn)中一個步驟,,再點(diǎn)“Option"鍵,出現(xiàn)選項如下
2)點(diǎn)“Auto Delta",,出現(xiàn)漸變模式創(chuàng)建窗口,。
點(diǎn)“Staring Cycle",輸入起始循環(huán)數(shù),;點(diǎn)“Delta Temperature",,輸入溫度變化值;點(diǎn)“Delta Time",,輸入時間變化值,。漸變模式適用于touchdown PCR,可以提高PCR反應(yīng)的特異性,。例:輸入起始循環(huán)數(shù)為2,,溫度變化值為+0.5℃,時間變化值為+5s,,則表示從第2個循環(huán)開始,,每循環(huán)一次升溫0.5℃,時間增加5S.
12,、增加暫停步驟:
1)點(diǎn)中一個步驟,,再點(diǎn)“Option"鍵,出現(xiàn)選項如下
2)點(diǎn)“Pause",,出現(xiàn)如下窗口,。
輸入暫停的起始位置,暫停間隔和暫停時間,,點(diǎn)“Done"確定,。上圖表示每隔10個循環(huán)暫停10s,在10個循環(huán)的第1個循環(huán)之前暫停,。
13,、編輯PCR程序完成后,點(diǎn)“Save"保存,。
點(diǎn)“Run Method",,輸入PCR程序名稱;點(diǎn) ,,選擇保存PCR程序的文件夾(如 果要保存在USB文件夾中,,需要先插U盤),。再輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度(這兩項在運(yùn)行程序時可以修改)。點(diǎn)“SaveδExit"確定,。
14,、回到PCR程序列表界面,選擇新建的PCR程序,。
15,、點(diǎn)“Start Run",出現(xiàn)運(yùn)行參數(shù)設(shè)置窗口
輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度,,點(diǎn)“Start Run Now"開始運(yùn)行PCR程序,。
16、儀器運(yùn)行選中的PCR程序,,顯示運(yùn)行監(jiān)視窗口
A- 運(yùn)行狀態(tài)欄,,顯示運(yùn)行溫度和剩余時間
B- 加熱警示標(biāo)記
C- 階段指示
D- 步驟溫度
E- 步驟時間
F- 步驟指示
G- 狀態(tài)報告,顯示日期,、時間和儀器狀態(tài)
H- 延伸箭頭,,點(diǎn)箭頭可以顯示更多的步驟
16、暫停運(yùn)行: 點(diǎn)“Pause Run",,儀器暫停,出現(xiàn)暫停選項欄
“Remaining Time"顯示暫停剩余時間,,“Elapse Time"顯示已暫停時間,。
如果需要修改暫停時間,點(diǎn) ,,輸入時間值,,點(diǎn)“Done"確定;點(diǎn)“Resume Run",, 結(jié)束暫停,,繼續(xù)運(yùn)行PCR程序。
7,、終止運(yùn)行:點(diǎn)“Stop"可以終止整個PCR程序,。
18、反應(yīng)報告:
PCR程序結(jié)束后,,儀器會自動生成反應(yīng)報告,,顯示當(dāng)次反應(yīng)的各項指數(shù)。該報告可以保存和打印,。
19,、PCR反應(yīng)結(jié)束后,打開熱蓋,,取出樣品,,關(guān)閉儀器電源,。并開蓋放置,使熱蓋和加熱模塊正常降溫,。
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