所分離的顆粒大小和密度相差較大:常速,、;若從樣品液中分離2種以上大小和密度不同的顆粒：差速離心;超速離心:差速離心法和密度梯度離心法,，后者又分速率區(qū)帶離心和等密度離心,。
1、 差速離心
采用不同離心速度與時(shí)間,，使不同沉降速度的顆粒分批分離,；
差速離心法：
原理：采用逐漸增加或低速和高速交替進(jìn)行離心，使沉降速度不同的顆粒在不同的分離速度及不同的離心時(shí)間下分批分離的方法,，稱為差速離心法,。
當(dāng)以一定離心力在一定的離心時(shí)間內(nèi)進(jìn)行離心時(shí)，在離心管底部就會(huì)得到最大和最重顆粒的沉淀,，分出的上清液在加上轉(zhuǎn)速下再進(jìn)行離心,，又得到第二部分較大、較重顆粒的“沉淀"及含小和輕顆?！吧锨逡?,，如此，多次離心處理,，即能把液體中的不同顆粒較好分開(kāi),。這時(shí)所得沉淀是不純的，需經(jīng)再懸浮和再離心（2—3次）,，才能得到較純顆粒,。
常用于從組織勻漿中分離細(xì)胞和病毒,。
2,、 密度梯度
又稱速率—區(qū)帶離心,沉降系數(shù)較接近的物質(zhì)分離的方法,；
原理：不同顆粒之間存在沉降系數(shù)差時(shí)，在一定離心力作用下,，顆粒各自以一定速度沉降,，在密度梯度不同區(qū)域上形成區(qū)帶的方法。
介質(zhì)梯度應(yīng)預(yù)先形成,，介質(zhì)的最大密度要小于所有樣品顆粒的密度,。常用的有蔗糖、甘油,；
密度梯度液的制備用梯度混合器,，形成由管口到管底逐步升高的密度梯度；
操作：離心前將樣品小心鋪放在密度梯度溶液表面,，離心形成區(qū)帶,。離心后不同大小、不同形狀,、有一定沉降系數(shù)差異的顆粒在密度梯度液中形成若干條界面清楚的不連續(xù)區(qū)帶,；
可用來(lái)分離核酸、蛋白質(zhì),、核糖體亞基及其它成分,。
3、
原理：當(dāng)不同顆粒存在浮力密度差時(shí),，在離心力場(chǎng)下,，在密度梯度介質(zhì)中，顆?；蛳蛳鲁两?，或向上浮起，一直移動(dòng)到與它們各自的密度恰好相等的位置上形成區(qū)帶,，從而使不同浮力密度的物質(zhì)得到分離,；
區(qū)別:離心介質(zhì)、密度梯度范圍與密度梯度離心不同,，欲分離的顆粒密度處于離心介質(zhì)密度范圍內(nèi),。
介質(zhì)有：氯化銫、硫酸銫,、溴化銫,、三碘苯衍生物等。
操作：介質(zhì)溶液與樣品液混合均勻,，足夠時(shí)間離心,。
介質(zhì)梯度不需預(yù)先制備,，離心時(shí)把密度均一的介質(zhì)液和樣品混合后裝入離心管，通過(guò)離心形成梯度,，讓顆粒在梯度中進(jìn)行再分配,。常用來(lái)分離提取核酸、亞細(xì)胞器和質(zhì)粒,。
