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旦鼎簡談PCR儀的種類和選購

時間:2023/5/25閱讀:1055
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【PCR儀的種類】
  分類總是五花八門,總體來說可以分為PCR擴增儀和實時熒光PCR儀兩大類,,有人也把它們稱為半自動和全自動,,或者定性和定量,都是比較不準(zhǔn)確的稱呼,。

  PCR最重要的就是個升降溫過程,,最初的水浴鍋式PCR,就是三個水浴箱,一個機械臂,,定時抓出反應(yīng)槽轉(zhuǎn)換水浴鍋,。這種東東體積大,迅速慢,,但其實結(jié)果并不比以后的PCR儀差,,我現(xiàn)在都很欣賞。后來有人利用致冷和加熱做成了,,固定位置升降溫的PCR擴增儀,。


  后來隨著定量技術(shù)的發(fā)展,有公司將擴增儀和檢測做成一體,,也就成了現(xiàn)在所謂的全自動(或定量)PCR儀,。當(dāng)然標(biāo)準(zhǔn)的叫實時熒光定量PCR儀。

  【品牌】

  什么東西都有品牌,,現(xiàn)在國內(nèi)國外PCR儀的品牌很多,,就國外而言比較著名的有:

  ABI美國應(yīng)用生物公司:老牌的生物公司貴族,其收購了原來的PE,,而PE公司是PCR的*,,旗下有很多經(jīng)典的PCR儀,有5700(已停產(chǎn)),、7700(已停產(chǎn)),、7000、7900等實時熒光定量PCR儀,。

  ROCHE羅氏診斷:炙手可熱的新貴,,LIGHTCYCLER是其的PCR儀,市場做得很不錯,,以科研定位為主,,但在國內(nèi)很多醫(yī)院使用,其很特色離心,、氣加熱、毛細(xì)管等,,設(shè)計另類,,是最有特色的PCR儀,當(dāng)然好壞另議,,就單其另辟蹊徑的技術(shù)能力和膽識就值的佩服,。


  MJ:剛?cè)胫袊拿鳎琈J的擴增儀在生命科研領(lǐng)域比較出名,,其產(chǎn)品比較適合高通量檢測,,人類基因組計劃用得很多。其實時熒光PCR儀剛進(jìn)入中國不久,,孔間能使用不同溫度是其特色,。這點其實比較有用,。

  伯樂:呵,廉價的麥當(dāng)勞,,ICYCLER是其主打,,進(jìn)入中國已經(jīng)比較久了,產(chǎn)品和5700一樣,,是擴增儀上加裝定量模塊而成,,特點是價格較低。

  國內(nèi)現(xiàn)在做的也很多,,比如杭州博日,、杭州朗基、上海楓嶺,、廈門安普利等,。

  【選購】

  準(zhǔn)確的講包括實時熒光定量在內(nèi)都沒有自動加樣和標(biāo)本處理系統(tǒng),只能算半自動的,。PCR儀是個簡單的東東,,一個溫控設(shè)備和一個檢測設(shè)備而已。

  關(guān)于溫控,,主要是介質(zhì)問題,。理想的介質(zhì)是導(dǎo)熱性好、比熱大,、接觸緊密的東東,。

  這方面好的是水浴和油浴,比熱大(油比水更大),、溶劑化物體,,與反應(yīng)物無縫接觸,效果當(dāng)然最好,。但是自動化,,小型化難,只有最初的水浴鍋式使用,。

  硅加熱,,這是使用普遍的一種,優(yōu)點:易自動化,、速度快,、直接加熱降溫,效果當(dāng)然好,,但是第一成本較高,,第二其使用的介質(zhì)是金屬,導(dǎo)熱雖然好,但是與反應(yīng)管,,很難做到無縫接觸,,定性時代可以加油,但用熒光定最,,由于油有熒光信號不能用,。所以在無縫接觸上差一些。第三由于是底部加熱,,下部壓力較大,,有溢出的可能,不過新的儀器在加熱蓋以后解決了這個問題,。

  空氣加熱,,用空氣做介質(zhì)有優(yōu)點,與反應(yīng)體系無縫接觸,,但是空氣的導(dǎo)熱性差,、比熱小的弱點明顯。因此空氣加熱的要利用離心來產(chǎn)生空氣流動,,增強導(dǎo)熱性,,同時使用毛細(xì)管,加大接觸面積,、試劑微量化來彌補,。這樣做了以后效果還是不錯。但有的廠商把什么離心,、毛細(xì)管的好處大講特講,,對氣加熱的弱點閉口不談,卻是高明的市場手法,。同時,,使用離心,對標(biāo)本量增大是有影響的并且標(biāo)本量越大,,空氣比熱小的弱點就越明顯,,所以空所加熱的儀器標(biāo)本量都比較小。使用毛細(xì)管后由于反應(yīng)液與管的接觸面積增大,,吸附現(xiàn)象更大,,因此試劑的通用性差一般要專門開發(fā),成本高,,雖然試劑用量少,但因為是專用試劑,,每人份就是以實際量算,,并不省試劑。反而增加了毛細(xì)管成本。

  關(guān)于功能,,所有的PCR儀功能都大體相同,。只有MJ孔間能使用不同溫度比較,這對于多項目同時檢測以及循環(huán)參數(shù)的調(diào)整比較有用,。但其實時熒光的儀器剛進(jìn)入中國不久,,具體如何還不得而知。

  關(guān)于選購,,根據(jù)單位情況而定,,由于PCR的技術(shù)含量其實并不高,好的國產(chǎn)儀器如杭州博日(與日本著名廠商大和有關(guān))也差不太多,。關(guān)于進(jìn)口儀器,,羅氏的儀器不錯,但如果標(biāo)本量大,,建議不要用羅氏,。一則會累死的。另外,,每個標(biāo)本要分?jǐn)偟臉?biāo)準(zhǔn)曲線,、對照成本太高。同時,,試劑也比較受限,。

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