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光柵型全波長酶標(biāo)儀的工作原理

時間:2023/5/22閱讀:1215
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光柵型全波長酶標(biāo)儀又稱微孔板分光光度計(jì)、全波長讀板機(jī),,以光柵為分光元件,、以微孔板為樣品載具的生化識讀設(shè)備,主要用于科研領(lǐng)域,。光柵型全波長酶標(biāo)儀與傳統(tǒng)的濾光片型酶標(biāo)儀相比,,具有如下優(yōu)勢:

一、波長選擇不受限制

多功能酶標(biāo)儀的分類方法眾多,,一般來說,,可以分為濾光片型和光柵型兩大類??傮w來說,,濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,配合二向色鏡(其實(shí)也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng),,可以滿足大部分實(shí)驗(yàn)的需要,,是日常檢驗(yàn)的主流,。
    但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長和數(shù)量限制,不可能滿足日益增加的實(shí)驗(yàn)類型的檢測需要,,而且有時需要對物質(zhì)的吸收,、激發(fā)和發(fā)射光譜進(jìn)行研究,所以后來就誕生了光柵型的儀器,。推出光柵型多功能酶標(biāo)儀是MD公司,。
    光柵型酶標(biāo)儀的推陳出新,使得用戶在波長選擇上不再受限,,如上海閃譜生物科技公司的SP-Max 2300A光柵型全波長酶標(biāo)儀,,光譜范圍可達(dá)190nm-1000nm,波長任意可調(diào),而且在雜光率,、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系統(tǒng),。有的還可實(shí)現(xiàn)實(shí)現(xiàn)了帶寬連續(xù)可調(diào),如SP-Max 3500型多功能全波長熒光酶標(biāo)儀,。這些都是目前濾光片型酶標(biāo)儀所不能或者較難實(shí)現(xiàn)的,。目前,光柵型全波長酶標(biāo)儀已經(jīng)成為了科研主流,。

二,、雜光率低,,波長準(zhǔn)確性高

光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流,,多家廠家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高,。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,,最關(guān)鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長選擇的準(zhǔn)確性了。
    雜光率指得就是光源通過光柵后,,得到的光線中,,“不需要"的波長的光占所標(biāo)稱波長的光的比例,表征了濾光的純度,。由于光線干涉,、衍射等的復(fù)雜性,無論使用濾光片還是光柵,,雜光都是不可避免的,。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來說,,濾光片型的雜光率在10-4~10-5之間,,光柵型的可以做到10-6~10-7。由于此類雜光是非特異的,,而且會直接進(jìn)入最后的檢測器,,所以有多少的雜光就會引入多少的隨機(jī)誤差,。在熒光等檢測過程中,由于檢測器存在放大效應(yīng),,雜光率的干擾也會被指數(shù)級放大,。因此,雜光率就是一個濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo),。
    光柵的另一個重要指標(biāo)就是波長選擇的準(zhǔn)確性,。因?yàn)楹芏鄼z測是依賴于物質(zhì)在某個波長的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測定,,實(shí)際檢測波長偏離260nm幾個nm以上的話,,OD值與最終濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會發(fā)生改變。因此,,一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng),,他的波長選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5~1nm之間。波長偏離過大有時就會影響到最終結(jié)果的準(zhǔn)確性,,而上海閃譜生物科技公司的SP-Max 3500型,、SP-Max 2300A光柵型全波長掃描儀的波長選擇準(zhǔn)確性可達(dá)±0.2nm,為業(yè)界優(yōu),。
    這兩個參數(shù)可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)最關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù),,直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測量的結(jié)果,是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的最基本要求,。

三,、檢測靈敏度高

在保證檢測可靠的基礎(chǔ)上,不同儀器的下一個差異就體現(xiàn)在檢測的靈敏度上面,,這時人們關(guān)心的就是儀器能夠檢測到多弱的信號,。
    靈敏度涉及了整個光路系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和選料,很難說某一個部件會起決定性作用,。但是有一點(diǎn),,在各種單功能檢測項(xiàng)目中,光吸收檢測用非放大型的光電二極管,、熒光檢測用光電倍增管,、發(fā)光檢測用專門設(shè)計(jì)的單光子計(jì)數(shù)光電倍增管,這三種不同的檢測器是各自檢測領(lǐng)域的優(yōu)先選擇,。
    各單項(xiàng)檢測的優(yōu)結(jié)果都是用相應(yīng)檢測器完成的,。當(dāng)然也有的儀器出于成本等考慮,用一個檢測器兼容多種檢測模式,,這在一定程度上也能完成實(shí)驗(yàn)需求,,但是在性能上也會有所犧牲折中,無法實(shí)現(xiàn)各項(xiàng)檢測都達(dá)到優(yōu)化,。
    這說明了光柵型酶標(biāo)儀的研發(fā)又進(jìn)入了一個新的高度,,除了在靈活性上取得了的作用外,,還在檢測靈敏度等方面也逐漸替代傳統(tǒng)的濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型是科研領(lǐng)域多功能酶標(biāo)儀的未來主要發(fā)展趨勢,;而濾光片型儀器也正在往單項(xiàng)性能更優(yōu)的方面改進(jìn),。

四、樣品容器具有多樣性

除了常規(guī)的6~384/1536孔酶標(biāo)板檢測之外,,有些儀器還附帶了比色杯,、微量檢測板等的兼容功能。無論是使用立式比色杯,、臥式比色杯還是各種微量檢測板,,其目的都是給光程不固定的酶標(biāo)板檢測引入一個標(biāo)準(zhǔn)光程的概念。雖然酶標(biāo)板檢測也能通過光程校正等方式實(shí)現(xiàn)10mm光程OD值的換算,,但這只是一個數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換過程,,檢測誤差累積較多,實(shí)際使用效果不佳,。引入比色杯和微量檢測板后,,光吸收的檢測光程就被固定在10mm或者0.5mm等的標(biāo)準(zhǔn)長度,OD值換算更加簡單和準(zhǔn)確,。附帶了此類檢測功能的酶標(biāo)儀,,相當(dāng)于除了本身的多功能酶標(biāo)檢測之外,還能替代紫外可見分光光度計(jì)的功能,,使其功能更加全面,,儀器的性價比更高。

上海閃譜生物科技有限公司是國內(nèi)一的光柵型全波長酶標(biāo)儀生產(chǎn)商,,在上??莆案咄渴称?、藥品檢測儀器研制"項(xiàng)目的基礎(chǔ)上推出了SP-Max 3500型多功能全波長熒光酶標(biāo)儀,、SP-Max 2300A光柵型全波長酶標(biāo)儀、集全波長酶標(biāo)儀與超微量分光光度計(jì)為一體,,性能與進(jìn)口產(chǎn)品并駕齊驅(qū),,是科研用戶的第一選擇。

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