Nanodrop是實(shí)驗(yàn)室中常見的分光光度計(jì),。與傳統(tǒng)需要比色皿的分光光度計(jì)相比,，Nanodrop所需樣品的體積大大減少，只需要2 μL,，同時(shí)也大大降低了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備以及清洗的時(shí)間,。這些優(yōu)勢(shì)使得科研人員能夠在一分鐘內(nèi)檢測(cè)多個(gè)樣品。當(dāng)然如果你有更多的樣品,，還嫌效率不夠高,，你可以選擇應(yīng)用Nanodrop 8000系統(tǒng)，它能夠同時(shí)檢測(cè)8個(gè)樣品,。

Nanodrop能夠在包括紫外及可見光區(qū)域在內(nèi)的光譜范圍內(nèi)檢測(cè)樣品的吸光度信號(hào),。在實(shí)驗(yàn)開始前，需要在儀器的軟件內(nèi)設(shè)置檢測(cè)樣品的種類,，包括蛋白質(zhì),，DNA, RNA等。根據(jù)吸光度,能夠計(jì)算樣品的濃度,。DNA及RNA 在260 nm處有大吸收度,，蛋白質(zhì)在280 nm處有大吸收峰值。濃度與吸光度的對(duì)應(yīng)關(guān)系見下表,。當(dāng)然表中濃度與吸光度對(duì)應(yīng)關(guān)系成立的前提是樣品必須具有很高的純度,。樣品純度可以通過A260/280判定,，其臨界值可參考下表。 大家可能注意到,，RNA的A260/280比值要比DNA的值高一些,，這是因?yàn)閴A基U的A260/280的比值要比堿基T的A260/280比值更高。

對(duì)Nanodrop檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生直接影響的因素就是樣品的純度,。A260/280是檢測(cè)樣品純度的一個(gè)指標(biāo),，但這個(gè)參數(shù)只衡量了蛋白質(zhì)與核酸之間相互污染的情況。沒有考慮DNA與RNA之間彼此污染以及其他物質(zhì)污染的情況,，比如苯酚在270 nm附近具有較大的吸光值,。

因此在利用Nanodrop檢測(cè)核酸濃度的時(shí)候，除了A260/280外,，A260/230也是檢測(cè)樣品純度的一個(gè)指標(biāo),，高純度DNA和RNA的兩個(gè)臨界值同樣是1.8以及2.0。A260/230在2.0-2.2之間是合理的數(shù)值,。對(duì)于純的核酸,，A260/230的值通常大于A260/280的值。核酸提取過程中殘留的有機(jī)物通常會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響,。如果檢測(cè)結(jié)果顯示230nm處具有很大的吸光值,，樣品很有可能被EDTA，碳水化合物或者硫氰酸胍等物質(zhì)污染了,。

Nanodrop的檢測(cè)范圍,。對(duì)于核酸來說，Nanodrop的檢測(cè)濃度范圍在2ng-15μg/μL之間,。所以當(dāng)樣品的濃度很低時(shí),，比如從單個(gè)或少量細(xì)胞中提取的DNA或RNA，利用Nanodrop來測(cè)量濃度可能就不適合了,。這時(shí)需要考慮其他的核酸定量方法比如熒光染料的方法,。