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上海旦鼎 流式細(xì)胞儀使用方法(二)

時(shí)間:2019/8/24閱讀:1952
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通過(guò)預(yù)設(shè)的獲取模式文件進(jìn)行樣品分析
 

  1.從蘋(píng)果標(biāo)志中選擇CELLQUEST,新視窗出現(xiàn)后從File指令欄中選擇Open,,打開(kāi)預(yù)設(shè)的獲取模式文件,。

  2.從屏幕上方Acquire指令欄中,,選取Connect to Cytometer進(jìn)行電腦和儀器的連機(jī),。將出現(xiàn)的Acquisiton 

  Control對(duì)話(huà)框移至合適位置,。

  3.從Cytometer指令欄中選取Instrument Settings,在其對(duì)話(huà)框中選擇Open以調(diào)出以前存儲(chǔ)的相同實(shí)驗(yàn)的儀器設(shè)定,,按Set 確定,。

  4.在Acquire指令欄中,選擇Acquisition&Storage決定儲(chǔ)存的細(xì)胞數(shù),,參數(shù),,信號(hào)道數(shù)。其中Resolution在做細(xì)胞表面標(biāo)志時(shí)選擇256,,做DNA時(shí)選擇1024,。Parameter 

  Saved…則根據(jù)不同的檢測(cè)對(duì)象選擇不同的參數(shù)。

  5.在Acquire指令欄中,,選擇Parameter 

  Description,,以決定文件存儲(chǔ)位置(folder),文件名稱(chēng)(file),,樣品代號(hào)以及各種參數(shù)的標(biāo)記(panel),,即安排tube1,2,,3…的檢測(cè)參數(shù),。一般本儀器獲取的數(shù)據(jù)按照檢測(cè)對(duì)象的不同分別儲(chǔ)存于FACStation 

  G3\BD Applications \CELLQuest \IMM 和DNA 文件夾中。文件根據(jù)日期命名,。

  6.在Cytometer指令欄中,,選擇Counters,將此對(duì)話(huà)框移至合適位置,,以便于隨時(shí)觀(guān)察events計(jì)數(shù),。

  7.將樣品試管放至檢測(cè)區(qū),在Acquire Control對(duì)話(huà)框中選取Acquire以啟動(dòng)樣品分析測(cè)定,。

  8.微調(diào)儀器設(shè)定,,待細(xì)胞群分布合適后選擇Acquire Control對(duì)話(huà)框中Pause, Abort, 

  去除Setup前的“?”,開(kāi)始正式獲取信號(hào),,存儲(chǔ)數(shù)據(jù),。

  9.當(dāng)一定數(shù)目的細(xì)胞被測(cè)定后,獲取會(huì)自動(dòng)停止,,并會(huì)自動(dòng)存儲(chǔ)數(shù)據(jù)。重復(fù)步驟7,,繼續(xù)分析下一個(gè)樣品,,直到所有的樣品數(shù)據(jù)分析完畢,。

  ?當(dāng)所有樣品分析分析完畢,即換上三蒸水,,并將流式細(xì)胞儀置于“STANDBY”狀態(tài),,以保護(hù)激光管。
 

  五.關(guān)機(jī)程序:
 

  1.從File中選擇Quit, 退出軟件,,選擇Don’t Save至蘋(píng)果屏幕,。

  2.用4ml 1:10稀釋的漂白水作樣品,將樣品置于旁位(vacuum is on),,以外管吸去約2ml,,在將樣品架置于中位(vacuum is 

  off),再HIGH RUN 5分鐘(內(nèi)管吸去2ml),。

  3.改用三蒸水4ml作樣品,同上處理,。

  4.按Prime三次。

  5.此時(shí)儀器自動(dòng)轉(zhuǎn)為STANDBY狀態(tài),,換2ml三蒸水,。必須在儀器處于“STANDBY”狀態(tài) 

  10分鐘后再依次關(guān)掉計(jì)算機(jī)、打印機(jī),、主機(jī),、穩(wěn)壓電源,以延長(zhǎng)激光管壽命,,并確保應(yīng)用軟件的正常運(yùn)行,。

  6.填寫(xiě)使用登記表。

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