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當(dāng)前位置：上海旦鼎國際貿(mào)易有限公司>>技術(shù)文章>>PCR儀循環(huán)擴增儀的工作原理
PCR 擴增的步驟
首先將模板 DNA 置于 92℃ -96℃,，進(jìn)行變性（denaturation）處理，使 dsDNA 在高溫下解鏈成為 ssDNA ,，且熱變性不改變其化學(xué)性質(zhì),；
然后退火（annealing） ，將溫度降至 37℃ -72℃,，使引物與模板的互補區(qū)相結(jié)合,；
然后，在 72℃ 條件下,， DNA 聚合酶將 dNTP 連續(xù)加到引物的 3'-OH 端,，合成 DNA ，這個步驟稱為延伸（extension）,。
這三個熱反應(yīng)過程的重復(fù)稱為一個循環(huán),，經(jīng)過 20-40 個循環(huán)可擴增得到大量位于兩條引物之間序列的 DNA 片段。
基本要素與DNA復(fù)制的基本要素是一致的,。待拷貝的 DNA 稱為模板,，它可以是雙鏈 DNA 也可是單鏈DNA,，結(jié)果擴增得到的產(chǎn)物是雙鏈狀態(tài)的。引物是 DNA 復(fù)制的先鋒,，就象結(jié)晶過程中的晶核,，引導(dǎo) DNA 的合成。在 PCR 擴增中一般使用合成的寡核苷酸作引物,。DNA 聚合酶是 DNA 復(fù)制的動力,，在 dNTP 等底物存在時在引物的引導(dǎo)下沿著模板 DNA 合成互補的 DNA 鏈。
以上是PCR儀的工作原理,，上海旦鼎（damking）為您講解,，希望對您有幫助。
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