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詳述紫外分光光度計測DNA濃度的方法

時間:2017/8/18閱讀:10987
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紫外分光光度計如何來測DNA濃度呢,?以下將由上海旦鼎技術(shù)人員為您詳細(xì)講解,歡迎瀏覽以下詳細(xì)內(nèi)容,!

將待測DNA溶液作適當(dāng)稀釋,,選用光程為0.5cm的石英比色杯,在紫外分光光度計上測定OD260和OD280的值,,按以下公式計算DNA濃度,。

DNA濃度(ng /µL)=OD260×50×稀釋倍數(shù)

當(dāng)OD260/OD280< 1.8,表示蛋白質(zhì)含量較高

當(dāng)OD260/OD280> 2.0,,表示RNA含量較高

當(dāng)OD260/OD280=1.8~2.0,,表示DNA較純

TE緩沖液:10mM Tris-HCl(pH 8.0);1mM EDTA(pH 8.0)

CTAB提取緩沖液:100mM Tris-HCl(pH=8.0),,20mM EDTA,,1.4M NaCl,2%CTAB,,2%ß-巰基乙醇

1×TBE緩沖液:Tris 10.8g,、硼酸5.5g、EDTA(0.5M,,pH8.0) 4mL,,加H2O至1000mL

10×上槽緩沖液:Tris108g、硼酸55g,、EDTA(1M,,pH8.0)20mL,加H2O至1000mL,,稀釋10倍使用

下槽緩沖液:Tris 54g,、無水NaAc 205g、硼酸27.5g,、EDTA(0.5M,,pH8.0)20mL,加H2O定溶至1000mL,,稀釋5倍使用Loading buffer:甲酰胺49mL,、EDTA(0.5M,pH8.0)1mL,、溴酚藍(lán)0.125g,、二甲苯氰0.125g,,混合備用

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