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兔子雌二醇ELISA試劑盒

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【簡單介紹】

兔子雌二醇 E2 ELISA試劑盒 rabbit Estradiol,E2 ELISA試劑盒

【詳細說明】

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(1) 酶與抗體的活性 常用瓊脂擴散或免疫電泳法,,使抗原與抗體形成沉淀線,,經(jīng)PBS漂洗1天,再以蒸餾水浸泡1小時,,將瓊脂凝膠片浸于酶底物溶液中著色,,如果出現(xiàn)應有的顏色反應,再用生理鹽水浸泡,,顏色仍然不褪,,表示結合物既有酶的活性,也有抗體活性,。良好的結合物在顯色后,,瓊擴滴度應在1:16以上。另一個測定方法是用系列稀釋的酶標抗體直接以ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)方法進行方陣滴定,,此法不僅可以測定標記效果,,還可以確定酶標抗體的使用濃度,。   (2) 結合物的定量測定 一般是對結合物中的酶和IgG進行定量測定,。常用紫外分光光度計于403nm和280nm進行測定,,然后按下列公式計算:   酶量(mg/ml)=OD403×0.42   IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62   對于過碘酸鈉氧化法制備的標記抗體量,按下列公式計算:   IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62   已知酶量和IgG量后,,即可計算出標記抗體的摩爾(mol)比值,。   HRP/IgG摩爾比值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4   結合物中酶總量=HRP(mg/ml)×結合物溶液量   結合物產(chǎn)率=結合物中酶總量/標記時加入的酶量×100%   用于ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)的結合物的酶量為400(g/ml時效果一般,為500(g/ml時效果較好,,達 1000(g/ml時效果,。mol.比值由于結合物中含的IgG并不*可靠,所以不能作為主要參數(shù),。一般認為mol.比值為0.7時效果一般,,1.0時效果較好,1.5-2.0時,。酶結合率為 7%時效果一般,,為9%-10%較好,達30%以上時,。

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