兔子脂蛋白磷脂酶A2ELISA試劑盒
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兔子脂蛋白磷脂酶A2ELISA試劑盒
方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法:用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,,每孔加0.1ml,,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次,。↓ 加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌,。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照) ↓ 于反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌,。↓ 其余步驟同“雙抗體夾心法”的4,、5、6,。編輯本段(三)試劑器材1. 試劑 (1)包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液): NaHCO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸餾水至1000ml(2)洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml (3)稀釋液:牛血清白蛋白(BSA)0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清,、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。(4)終止液(2M H2SO4):蒸餾水178.3ml,,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml,。(5)底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸): 0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml 0.1M檸檬酸(19.2克/L)24.3ml 加蒸餾水50ml。(6)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液: TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇)0.5ml 底物緩沖液(PH5.5)10ml 0.75%H2O2 32μl(7)ABTS使用液: ABTS 0.5mg 底物緩沖液(PH5.5)1ml 3%H2O2 2μl (8)抗原,、抗體和酶標(biāo)記抗體,。(9)正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。2.器材:(1)聚苯乙烯塑料板(簡(jiǎn)稱(chēng)酶標(biāo)板)40孔或96孔,,ELISA檢測(cè)儀,,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,,小毛巾,,洗滌瓶,。(2)小燒杯、玻璃棒,、試管,、吸管和量筒等。(3)4℃冰箱,,37℃孵育箱,。
兔子脂蛋白磷脂酶A2 ELISA試劑盒 Rabbit lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA試劑盒
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