兔環(huán)磷酸腺苷ELISA試劑盒

　 （二） 用于標(biāo)記的酶 用于標(biāo)記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性：有高度的活性和敏感性,；在室溫下穩(wěn)定,；反應(yīng)產(chǎn)物易于顯現(xiàn),；能商品化,。目前應(yīng)用較多的有辣根過氧化物酶（HRP）,、堿性磷酸酶,、葡萄糖氧化酶等,，其中以HRP應(yīng)用zui廣,。 　　1.辣根過氧化物酶（HRP） 過氧化物酶廣泛分布于植物中,，辣根中含量zui高，從辣根中提取的稱辣根過氧化物酶（HRP）,，是由無色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構(gòu)成的一種糖蛋白（含糖量18％）,，分子量約40 000，約由300個(gè)氨基酸組成,，等電點(diǎn)為pH 3-9,，催化反應(yīng)的zui適pH值因供氫體不同而稍有差異，一般多在pH 5左右,。此酶溶于水和50％飽和度以下的硫酸銨溶液,。酶蛋白和輔基的zui大吸收光譜分別為275nm和403nm。 　　酶的純度以RZ表示：RZ＝OD403/OD275 　　純酶的RZ多在3.0以上,，zui高為3.4,。RZ在0.6以下的酶制品為粗酶，非酶蛋白約占 75％,，不能用于標(biāo)記,。RZ在2.5以上者方可用于標(biāo)記,。HRP的作用底物為過氧化氫，催化反應(yīng)時(shí)的供氫體有幾種：（1）鄰苯二胺（OPD）,，產(chǎn)物為橙色,，可溶性，敏感性高,，zui大吸收值在490nm,，可用肉眼觀察判別，容易被濃硫酸終止反應(yīng),，顏色可在數(shù)小時(shí)內(nèi)不改變,是目前國內(nèi)ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）中zui常用的一種,；（2）聯(lián)大茴香胺（OD）,產(chǎn)物為橘黃色，zui大吸收值在400nm,，顏色較穩(wěn)定,；（3）5－氨基水楊酸（5－AS）：產(chǎn)物為深棕色，zui大吸收值在449nm,，部分溶解,，敏感性較差；（4）鄰聯(lián)甲苯胺（OT）產(chǎn)物為藍(lán)色,，zui大吸收值在630nm,，部分溶解，不穩(wěn)定,，不耐酸,，但反應(yīng)快，顏色明顯,。 　　2.堿性磷酸酶 系從小牛腸粘膜和大腸桿菌中提取,，由多個(gè)同功酶組成。它們的底物種類很多,，常用者為硝基苯磷酸鹽,，廉價(jià)無毒性。酶解產(chǎn)物呈黃色,，可溶,，zui大吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反應(yīng)系統(tǒng)中,，37℃1分鐘水解1μg磷酸苯二鈉為一個(gè)單位,。 　

兔環(huán)磷酸腺苷ELISA試劑盒 Rabbit cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA試劑盒
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