兔子中性粒細胞彈性蛋白酶ELISA試劑盒

方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法: 1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml,。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,，4℃ 過夜。次日,，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次,，每次3分鐘,。（簡稱洗滌，下同）,。2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌,。（同時做空白孔,，陰性對照孔及陽性對照孔）。3.加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml,。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌,。 4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃ 10～30分鐘。5.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。6.結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強,，陰性反應(yīng)為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”,、“-”號表示,。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處,，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,，即為陽性,。 　

兔子中性粒細胞彈性蛋白酶ELISA試劑盒 Rabbit neutrophil elastase,NE ELISA試劑盒
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