兔子白介素1可溶性受體I ELISA試劑盒

方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法: 1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,，4℃ 過夜。次日,，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次,，每次3分鐘,。（簡稱洗滌，下同）,。2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌,。（同時做空白孔,，陰性對照孔及陽性對照孔）。3.加酶標抗體：于各反應孔中,，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml,。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌,。 4.加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃ 10～30分鐘。5.終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml,。6.結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深,，陽性程度越強,，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”,、“-”號表示,。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處,，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,，即為陽性,。 　

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