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拉沙熱病毒PCR檢測試劑盒實驗規(guī)則
點擊次數(shù):378 發(fā)布時間:2024-11-15
拉沙熱病毒PCR檢測試劑盒實驗規(guī)則:
1,、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定,。但有專業(yè)人員進行矯正。
2,、要配備20ul,、50ul、100ul,、1000ul和排槍各一支,。吸取不同的液體后,要更換槍頭,。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時,。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4,、實驗時,,要使底物避光保存,。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確,。
6、吸取液體時,,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差。
7,、將液體加到酶標(biāo)孔中時,,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會自然流下去,。
8、液體全部加完后,,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能,。
9,、應(yīng)盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,。
10,、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。