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技術(shù)文章
HGC-27細胞,，人未分化胃癌細胞操作步驟
點擊次數(shù)：599 發(fā)布時間：2024-10-31
在繼續(xù)探討HGC-27細胞，即人未分化胃癌細胞的操作步驟時,，我們需細致入微地確保每一步的精確性和無菌操作的重要性,。
首先，進行細胞復(fù)蘇時,，需快速將凍存的HGC-27細胞從液氮中取出,，并迅速置于37℃水浴中輕輕搖晃，確保細胞在1分鐘內(nèi)融化,。隨后,，將細胞懸液轉(zhuǎn)移至預(yù)裝有培養(yǎng)基的離心管中，輕柔混勻后離心,，去除上清液,，再加入新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，接種至培養(yǎng)瓶中,，置于37℃,、5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代時,，待細胞長至80%-90%融合度,，棄去舊培養(yǎng)基,，用PBS清洗兩次后，加入適量胰酶消化細胞,，待細胞變圓,、間隙增大時，加入培養(yǎng)基終止消化,，吹打制成細胞懸液,，按一定比例分至新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
此外,，細胞凍存也至關(guān)重要,。選擇對數(shù)生長期的細胞，按上述方法消化,、離心后,，用細胞凍存液重懸細胞，調(diào)整細胞密度至適宜范圍,，分裝至凍存管中,，標記好細胞名稱、凍存日期等信息后,，按梯度降溫法逐步冷凍,，最終置于液氮中長期保存。
在整個操作過程中,，嚴格的無菌操作,、精準的細胞計數(shù)以及適時的培養(yǎng)基更換，都是確保HGC-27細胞健康生長和實驗成功的關(guān)鍵,。