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HGC-27細(xì)胞,，人未分化胃癌細(xì)胞操作步驟
點(diǎn)擊次數(shù)：358 發(fā)布時(shí)間：2024-10-31
在繼續(xù)探討HGC-27細(xì)胞,，即人未分化胃癌細(xì)胞的操作步驟時(shí),，我們需細(xì)致入微地確保每一步的精確性和無(wú)菌操作的重要性。
首先,，進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),，需快速將凍存的HGC-27細(xì)胞從液氮中取出，并迅速置于37℃水浴中輕輕搖晃,，確保細(xì)胞在1分鐘內(nèi)融化,。隨后，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至預(yù)裝有培養(yǎng)基的離心管中,，輕柔混勻后離心,，去除上清液，再加入新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，接種至培養(yǎng)瓶中,，置于37℃、5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
細(xì)胞傳代時(shí),，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%-90%融合度，棄去舊培養(yǎng)基,，用PBS清洗兩次后，加入適量胰酶消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓,、間隙增大時(shí)，加入培養(yǎng)基終止消化,，吹打制成細(xì)胞懸液,，按一定比例分至新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
此外,，細(xì)胞凍存也至關(guān)重要,。選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,，按上述方法消化、離心后,，用細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,，調(diào)整細(xì)胞密度至適宜范圍，分裝至凍存管中,，標(biāo)記好細(xì)胞名稱,、凍存日期等信息后，按梯度降溫法逐步冷凍,，最終置于液氮中長(zhǎng)期保存,。
在整個(gè)操作過(guò)程中，嚴(yán)格的無(wú)菌操作,、精準(zhǔn)的細(xì)胞計(jì)數(shù)以及適時(shí)的培養(yǎng)基更換,，都是確保HGC-27細(xì)胞健康生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。