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技術(shù)文章

溶組織梭菌Clostridium histolyticum菌種培養(yǎng)

點(diǎn)擊次數(shù):587 發(fā)布時(shí)間:2024-3-6

溶組織梭菌Clostridium histolyticum菌種培養(yǎng):


⒈ 孢子制備


⑴ 放線菌孢子的制備


一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁,、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等,。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成,。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成,。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。


⑵ 產(chǎn)品僅限用于科研霉菌孢子的制備


霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米,、小米,、玉米、麩皮,、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基,。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天,。


⒉ 種子制備


⑴ 搖瓶種子制備


搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶,、子瓶兩級培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長,。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方,。


⑵ 種子罐種子制備


種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子,、二級種子和三級種子的制備,。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵,。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵,。


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