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液相色譜柱使用結(jié)構(gòu)及保養(yǎng)

閱讀：2308      發(fā)布時間：2016-4-25
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    液相色譜柱使用及保養(yǎng)
    液相色譜儀由高壓液體泵,、檢測器及液相色譜柱等三部分組成，其中液相色譜柱的正確安裝和使用,，是液相色譜工作的關(guān)鍵,；也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實驗數(shù)據(jù)的必經(jīng)之路。
液相色譜柱的安裝：
   1,、液相色譜柱的結(jié)構(gòu)：
   a,、空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成,。
   柱接頭采用低死體積結(jié)構(gòu)，柱接頭是兩端螺紋組件,，一端是為7/16英寸外螺紋,，另一端是3／16英寸的內(nèi)螺紋(國內(nèi)外已規(guī)范化)。7／16英寸外螺紋與1／4英寸柱管(Φ 6.35mm)連接,，中間放置壓壞用于密封,。3／16英寸的內(nèi)螺紋與1／16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接，中間也放置壓環(huán)用于柱接頭的密封,。為了盡量減少柱外死體積,，在安裝色譜柱時，用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)后要盡量插到底,，然后再擰緊空心螺釘,。壓環(huán)被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的管長度應嚴格控制在2．5mm長或其他固定尺寸)。
   在兩端柱接頭內(nèi),，柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或濾網(wǎng)),，用于封堵柱填料不被流動相沖出柱外而流失?？罩鹘M件均為316#不銹鋼材質(zhì),，能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性，故使用時要注意,，柱及連接管內(nèi)不能長時間存留此類溶劑,，以避免腐蝕。
   b,、柱填料：
   液相色譜柱的分離作用是在填料與流動相之間進行的,，柱子的分類是依據(jù)填料類型而定。
   正相柱：多以硅膠為柱填料,。根據(jù)外型可分為無定型和球型兩種,，其顆粒直徑在3—10 μm的范圍內(nèi)。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN,，-NH2等官能團即所謂的鍵合相硅膠,。
   反相柱：主要是以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合十八烷基官能團(ODS)的非極性填料,。也有無定型和球型之分,。
   常用的其他的反相填料還有鍵合C8、C4,、C2,、苯基等，其顆粒粒徑在3—10 μm之間,。
液相色譜柱的使用：
   色譜柱在使用前,，進行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來,，作為今后評價柱性能變化的參考,。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相,、柱溫等條件的差異而有所不同,；另外，在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是*條件),，只有這樣,，測得的結(jié)果才有可比性。
1,、樣品的前處理：
   a,、使用流動相溶解樣品。
   b,、使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì),。
   c、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì),。
2,、流動相的配制：
    液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的,，因此要求流動相具備以下的特點：
   a、流動相對樣品具有一定的溶解能力,，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中),。
   b、流動相具有一定惰性,，與樣品不產(chǎn)生化學反應(特殊情況除外),。
   c、流動相的黏度要盡量小,，以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果,；同時降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度),。
   d,、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,，使用對紫外吸收較低的溶劑配制,。
   e、流動相沸點不要太低,，否則容易產(chǎn)生氣泡,，導致實驗無法進行。
   f,、在流動相配制好后,，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用,。

輸液泵的使用及維護

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