氨基柱的柱效檢測及保存方法
氨基柱是以硅膠作為基質(zhì)載體,,鍵合氨基的色譜柱,。氨基柱通常用于分析糖類化合物,所使用的流動相通常是甲醇,、乙腈和緩沖鹽溶液,,其中乙腈的使用相對較多。
使用氨基柱時易受水解影響,,因此需要注意以下事項(xiàng):
pH值越低,,水解發(fā)生的危險性越大,因此應(yīng)嚴(yán)格控制pH范圍,;
流動相中水的比例越高,,水解發(fā)生的危險性越大。
因此,,在使用后以及長時間放置該柱前,,必須進(jìn)行必要的清洗,并將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中以進(jìn)行保養(yǎng),。
氨基柱的柱效檢測:
柱效檢測是判斷一個用戶的經(jīng)驗(yàn)是否足夠的指標(biāo)之一,,用戶可以習(xí)慣配制一些柱效檢測標(biāo)準(zhǔn)溶液。在柱效檢測方面,,我們提供一個通用的方法,,可用于檢測硅膠柱和氰基柱。
流動相:10% 乙酸乙酯 + 90% 正己烷,,流速為1.0,。
標(biāo)準(zhǔn)溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯。
檢測波長為254nm,。
此方法特別適用于剛購買氨基柱時進(jìn)行檢測,,如有問題,可及時與氨基柱廠家溝通,。此外,,建議在柱子準(zhǔn)備放置相當(dāng)長一段時間之前,進(jìn)行充分清洗后進(jìn)行檢測,,以作為記錄留存。在平常的使用過程中,,如果分析物是重復(fù)的,,可以根據(jù)分析物的分離情況判斷氨基柱效;但是,如果分析物和分析條件不同時,,定期檢測柱效可以避免柱效下降導(dǎo)致分離不佳再分析查找原因這樣浪費(fèi)時間和勞力的過程,。特別要注意的是,當(dāng)氨基柱(或氰基柱)在反相條件下使用時,,請注意流動相的換相過渡問題,。
氨基柱沖洗:
在使用正相條件下的氨基柱時,可按硅膠柱的清洗方法進(jìn)行清洗,;在使用反相條件下的氨基柱時,,則應(yīng)按照C18柱的清洗方法進(jìn)行清洗。
氨基柱的保存:
在正相條件下,,使用氨基柱后,,將柱子清洗干凈,并用正己烷-乙腈(比例為99:1)保存,。
在反相條件下,,如短期不使用,可用甲醇或乙腈進(jìn)行保存,。若長期不使用,,則需要將甲醇逐步用異丙醇和CHCl3置換,最后用正己烷保存,。
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