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C18液相色譜柱的柱洗方法

閱讀:1936      發(fā)布時間:2023-2-27
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c18液相色譜柱是實驗室的通用型色譜柱,。填料是硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基,,有較高的碳含量和較好的疏水性,適用于大多數(shù)化合物,,包括非極性,、極性小分子及一些多肽及蛋白質(zhì)。
柱洗:
第一,、安捷倫的色譜柱有很多種,,所以要分清類型去沖洗。
第二,、作為普通C18柱,,尤其是硅膠基質(zhì)的普通C18柱,對酸堿鹽以及水,,都是造成柱子的損壞的流動相構成,。水不能過多(除了帶AQ的純水柱,一般各家品牌都有這款防水柱)我個人認為只要超過80%的水的流動相,,都會造成C18的壽命縮短,。所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。酸對柱子的損傷是不可逆的,,一定要控制PH,,我個人認為PH在2以下的都要做好費柱子的準備。堿性條件是對于硅膠基質(zhì)的C18的弱項,,一般的硅膠基質(zhì)的C18堿性條件都不太耐用,,但現(xiàn)在也有堿性PH11的柱子,但比較貴,。
第三沖洗方法的問題,。沖洗方法根據(jù)使用的流動相和樣品的不同沖洗方法要加以區(qū)分。一般不加酸堿鹽,,水相也不高的情況(如甲醇水60:40),,無需太過沖洗,沖洗的目的就是為了把樣品的雜質(zhì)沖出即可,。保存流動相保存即可,。酸和堿的條件下,原則上是將酸堿沖出色譜柱,,保存在甲醇水即可(如60:40比例可根據(jù)要使用的流動相,,只要水相不高即可),。

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