高效液相色譜系統(tǒng)一般由高壓輸液泵,、進(jìn)樣器、色譜柱,、檢測器,、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵,、色譜柱,、檢測器是關(guān)鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置,、在線脫氣機(jī),、自動進(jìn)樣器、預(yù)柱或保護(hù)柱,、柱溫控制器等,。一、高壓輸液泵
泵的種類很多,,按輸液性質(zhì)可分為恒壓泵和恒流泵,;恒流泵按結(jié)構(gòu)又可分為螺旋注射泵、柱塞往復(fù)泵和隔膜往復(fù)泵,。恒壓泵受柱阻影響,,流量不穩(wěn)定;螺旋泵缸體太大,,這兩種泵已被淘汰,。目前應(yīng)用最多的是柱塞往復(fù)泵。
二,、進(jìn)樣器
高效液相色譜早期使用隔膜和停流進(jìn)樣器,,裝在色譜柱入口處。現(xiàn)在大都使用六通進(jìn)樣閥或自動進(jìn)樣器,。進(jìn)樣裝置要求:密封性好,,死體積小,重復(fù)性好,,保證中心進(jìn)樣,,進(jìn)樣時對色譜系統(tǒng)的壓力,、流量影響小,。HPLC進(jìn)樣方式可分為:隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣,、閥進(jìn)樣,、自動進(jìn)樣。
三、色譜柱
色譜是一種分離分析手段,,分離是核心,,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高,、選擇性好,,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相,、氧化鋁,、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等,。
四,、檢測器
檢測器是HPLC儀的三大關(guān)鍵部件之一。其作用是把洗脫液中組分的量轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?。HPLC的檢測器要求靈敏度高,、噪音低(即對溫度、流量等外界變化不敏感),、線性范圍寬,、重復(fù)性好和適用范圍廣。
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