液相色譜流動相使用前為什么要脫氣,？脫氣有什么作用,？如何脫氣？脫氣不足可能造成哪些異?，F(xiàn)象,？

（1）脫氣的必要性：

a.氣泡會增加基線的噪聲，造成靈敏度下降,，甚至無法分析（噪聲增大,，基線不穩(wěn)，突然跳動）,。

b.溶解的氧氣還會導(dǎo)致樣品中某些組份被氧化,，溶解的氧氣與色譜柱中固定相（如烷基胺）發(fā)生反應(yīng)，柱效降低從而改變柱的分離性能,。

c.溶解氧能與某些溶劑（如甲醇,、四氫呋喃）形成有紫外吸收的絡(luò)合物，絡(luò)合物會提高背景吸收（特別是在260nm以下）,，并導(dǎo)致檢測靈敏度的輕微降低,，會在梯度淋洗時(shí)造成基線漂移或形成鬼峰（假峰）。

d.若用FLD（熒光檢測器）,，溶解氧在一定條件下還會引起淬滅現(xiàn)象,，特別是對芳香烴、脂肪醛、酮等,。在某些情況下,，熒光響應(yīng)可降低達(dá)95%。

（2）脫氣的作用：

a.除去其中溶解的氣體（如O2）,，以防止在洗脫過程中當(dāng)流動相由色譜柱流至檢測器時(shí),，因壓力降低而產(chǎn)生氣泡。

b.排出氣泡能減少泵工作的傷害,，提高檢測器的性能高,，改善靈敏度。

（3）脫氣的方式：

a.加熱回流法：效果較好,，但操作復(fù)雜,，且有毒性揮發(fā)污染,，同時(shí)需要考慮低沸點(diǎn)溶劑揮發(fā)造成的組成變化,。

b.抽真空脫氣法：缺點(diǎn)是易抽走有機(jī)相。

c.超聲脫氣法：流動相放在超聲波容器中（一般500mL溶液需超聲20~30min）,，此法不影響溶劑組成,。超聲時(shí)應(yīng)注意避免溶劑瓶與超聲槽底部或壁接觸，以免玻璃瓶破裂,，容器內(nèi)液面不要高出水面太多,。

d.氦氣脫氣法：在色譜操作前和進(jìn)行時(shí)，將惰性氣體噴入溶劑中,。嚴(yán)格來說,，此方法不能將溶劑脫氣，它只是用一種低溶解度的惰性氣體（通常是氦）將空氣替換出來,。主要利用液體中氦氣的溶解度比空氣低,，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好,，但成本高,。

e.在線真空脫氣法：利用在線脫氣機(jī)在線脫氣，智能控制,，無需額外操作,，成本低，脫氣效果明顯優(yōu)于以上幾種方法,，并適用于多元溶劑體系,。